| 研究概要 |
MGMTはアルキル化剤により引き起こされるDNAメチル化に対する修復酵素遺伝子である.我々はこれまでにアルキル化剤に暴露されうる胆管癌,胆嚢癌,肝細胞癌,胃癌において,免疫組織染色により,MGMT発現欠失は癌の悪性度と予後に強く相関することを見いだした.MGMTの発現欠失はDNAに点突然変異GC→AT transitionを惹起するため,MGMTの発現制御を介した癌悪性化の原因として,1つに下流の癌関連遺伝子群に蓄積されたmutationが,それらの発現および機能的異常により癌悪性度を増強する機序が推測される.そこでまず癌関連遺伝子(K-ras, p53, β-catenin)についてdirect sequenceにより遺伝子変異の検索を行った.その結果,明らかな相関は認めないものの,K-ras遺伝子ではその変異パターンがGC→AT transitionであることが判明した.第2の機序としてMGMT遺伝子以外の癌抑制遺伝子やDNA修復遺伝子にもepigenetic silencingが同時性に誘発されることによる悪性化の経路を推測している.実際,肝細胞癌ではMGMT遺伝子のpromoter領域のsequenceを行い,CpG methylationがMGMTの発現制御に強く関与することを証明しており,現在,他の遺伝子群(E-cadherin, p16)についてmethylation specific PCR法を用い解析中である.さらに我々はMGMTと共にミスマッチ修復遺伝子hMLH1, hMSH2の発現を検討した結果,その発現欠失が胆管癌,胆嚢癌,胃癌において予後不良をさらに増幅することを明らかにした.これはミスマッチ修復によるmutationのアポトーシス誘導機構が失活する機序を考えている.またMGMT(-), hMLH1(+)の胆嚢癌細胞株がアルキル化抗癌剤に対し高感受性を示すことを見いだしており,今後,臨床における実用化の可能性を考えている.
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