| 研究概要 |
イヌの壁ずり応力の異なる自家静脈グラフトモデルを作成した。4頭のイヌで長さ5cmの自家大腿静脈を採取して大腿動脈に端々吻合し、これをコントロール群とした。低血流・低ずり応力モデルは、膝下動脈の分枝を残して本館を結紮し、2週後の再手術で長さ5cmの自家大腿静脈を採取して大腿動脈に端々吻合した(低血流・低ずり応力群、n=4)、術中、血流速度、血圧、グラフト経などを測定して壁ずり応力を測定した。両群で4週後に、自家静脈グラフトを摘出し、内膜肥厚について検討した。コントロール群と比較して低血流・低ずり応力群で細内膜が有意に厚くなっていた。免疫染色で細胞増殖、アポトーシスについて調べたところ、低血流・低ずり応力群で増殖細胞及びアポトーシス細胞が有意にコントロール群と比較して多かった。
現在凍結標本を使用してPT-PCRを行う段階にいる。炎症性サイトカインのTNF-α、接着分子のP-セレクチン、内膜肥厚に関与しているNO、angiotensin、endthelin、adrenomedullinなどをGene Works, OLIGO^<TM>などを使用してprimer pair設計、最適温度、サイクル数の設定を行っている。今までイヌを使用したことのような実験は数が少なく、免疫染色を行うためのイヌに対する抗体やPCRを行う際に必要ないろいろな物質に対する報告済みのcDNAやPrimerなどがなく最適なprimer検索、調整などが困難であった。設定が終わりしだいRT-PCRを行う。定量的PCRも行い両群間で発現量に差がないかを調べる。
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