2000 年度実績報告書

新たに開発したTCマウスを用いたヒト型モノクローナル抗体の作製

研究課題

研究課題/領域番号	12470347
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	野澤志朗慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051557)
研究分担者	石田功キリンビール(株), 医薬カンパニー, プロジェクトリーダー(研究職) 久布白兼行慶應義塾大学, 医学部, 講師 (50170022) 塚崎克己慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (40118972)
キーワード	ヒト型モノクローナル抗体 / TCマウス / 子宮体癌 / ミサイル療法
研究概要	モノクローナル抗体(Mab)の作製技術が開発されて以来、既に四半世紀以上がたとうとしているが、その殆どがマウス型であったため、実地臨床でヒトに投与する場合に、human anti-mouse antibody(HAMA)の産生が大きな隘路になっていた。研究分担者は、この障害を乗り越えるために、ヒト染色体そのものをマウス個体への遺伝子導入ベクターとして利用するという全く新しいアプローチで、完全なヒト抗体(重鎖+軽鎖κ)を発現するTCマウス(trans-chromosomic mice)を世界に先駆けて開発することに成功した。一方、我々は子宮体癌由来培養細胞(SNG-II)を免疫原として、子宮体癌に高い特異性を有するマウス型Mabを開発し、その認識抗原が細胞膜上のフコシル化糖鎖(主としてLewis^b型糖鎖)であることを明らかにした経験に基づき、SNG-S(SNG-IIの亜株)をTCマウスに免疫し、ヒト型Mabの作製を試みた。細胞融合法は従来のマウス型の常法に従い、PEG4000を用い、マウス脾細胞とミエローマ細胞SP_2/O-Ag14の比率を1:5として行った。細胞融合後、ハイブリドーマの増殖を確認し、その培養上清を用い、SNG-S細胞を固相化したCell ELISA法により反応陽性ウェルを選別し、さらに免疫染色(ABC法)により、SNG-S細胞、子宮体癌組織との反応性を認めるものを、限界希釈法によりクローニングした。その結果、子宮体癌組織と反応し、正常子宮内膜とは反応しないクローン、および子宮体癌組織と血管内皮細胞とに反応するクローン等を選択することに成功した。次年度は、得られたMabの反応性、認識抗原の確認を順次進めるとともに、さらに細胞融合を行い、ミサイル療法等の臨床応用へ有用性のあるヒト型Mabの開発を目指す。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Kaneyuki Kubushiro, et al 6: "Biological characteristics of human uterine endometrial cancer variant cells selected for blood group H type 1 antigen : adhesion to vascular endothelial cells."Acta Histocemica et Cytochemica. 33・3. 209-213 (2000)
[文献書誌] Shinji Ohie, et al 6: "Cisplatin sensitivity of ovarian cancer in the histoculture drug response assay correlates to clinical response to combination chemotherapy with cisplatin, doxorubicin and cyclophosphamide."Anticancer Research. 20. 2049-2054 (2000)
[文献書誌] Yoshibumi Kaneta, et al 5: "Selective cytotoxicity of adriamycin immunoconjugate of monoclonal antibody MSN-1 to endometrial adenocarcinoma in vitro and in vivo."Oncology Reports. 7. 1099-1106 (2000)
[文献書誌] Shiro Nozawa, et al 2: "Gonadotropin-Releasing hormone analogue therapy for peritoneal inclusion cysts after gynecological surgery."The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 26・6. 389-393 (2000)
[文献書誌] 久布白兼行他2名: "新女性医学大系43 子宮体部の複合糖鎖"中山書店(平田直). 350 (2001)
[文献書誌] 宇田川康博他2名: "新女性医学大系43 子宮体部の複合糖鎖"中山書店(平田直). 350 (2000)

2000 年度 実績報告書

新たに開発したTCマウスを用いたヒト型モノクローナル抗体の作製

研究代表者

野澤 志朗 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051557)

研究成果

[文献書誌] Kaneyuki Kubushiro, et al 6: "Biological characteristics of human uterine endometrial cancer variant cells selected for blood group H type 1 antigen : adhesion to vascular endothelial cells."Acta Histocemica et Cytochemica. 33・3. 209-213 (2000)

[文献書誌] Shinji Ohie, et al 6: "Cisplatin sensitivity of ovarian cancer in the histoculture drug response assay correlates to clinical response to combination chemotherapy with cisplatin, doxorubicin and cyclophosphamide."Anticancer Research. 20. 2049-2054 (2000)

[文献書誌] Yoshibumi Kaneta, et al 5: "Selective cytotoxicity of adriamycin immunoconjugate of monoclonal antibody MSN-1 to endometrial adenocarcinoma in vitro and in vivo."Oncology Reports. 7. 1099-1106 (2000)

[文献書誌] Shiro Nozawa, et al 2: "Gonadotropin-Releasing hormone analogue therapy for peritoneal inclusion cysts after gynecological surgery."The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 26・6. 389-393 (2000)

[文献書誌] 久布白兼行 他2名: "新女性医学大系43 子宮体部の複合糖鎖"中山書店(平田直). 350 (2001)

[文献書誌] 宇田川康博 他2名: "新女性医学大系43 子宮体部の複合糖鎖"中山書店(平田直). 350 (2000)

2000 年度実績報告書

野澤志朗慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051557)

[文献書誌] 久布白兼行他2名: "新女性医学大系43 子宮体部の複合糖鎖"中山書店(平田直). 350 (2001)

[文献書誌] 宇田川康博他2名: "新女性医学大系43 子宮体部の複合糖鎖"中山書店(平田直). 350 (2000)