| 研究課題/領域番号 |
12470391
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| 研究機関 | 北海道医療大学 |
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研究代表者 |
東城 庸介 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (90111731)
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| 研究分担者 |
森田 貴雄 北海道医療大学, 歯学部, 助手 (20326549)
根津 顕弘 北海道医療大学, 歯学部, 助手 (00305913)
谷村 明彦 北海道医療大学, 歯学部, 助教授 (70217149)
荒川 俊哉 北海道医療大学, 歯学部, 講師 (40306254)
田隈 泰信 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (40095336)
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| キーワード | 唾液腺細胞 / カルシウムイオン / イノシトール1,4,5-ミリン酸 / C-キナーゼ / SNARE蛋白質 / GFP / イメージング / 開口分泌 |
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| 研究概要 |
1.顎下腺細胞のCa^<2+>応答を可視化し、導管細胞に腺房細胞とは異なるCa^<2+>情報伝達機構が存在することを示した。導管細胞のCa^<2+>応答と受容体mRNAの発現とはよく相関していた。
2.GFPと融合したIP_3受容体をHSY細胞およびSH-SY5Y細胞に発現させ、IP_3受容体の細胞内分布を可視化した。さらに膜に発現したGFP-IP_3がIP_3感受性Ca^<2+>チャネルとして機能していることを確認した。
3.FP-PKCαを細胞内に発現させ、細胞膜へのトランスローケーションを可視化した。膜穿孔細胞を用いた解析により、トランスローケーションがCa^<2+>および蛋白質リン酸化によって調節されていることを明らかにした。
4.IP_3受容体の膜結合ドメインにCFPとYFPを結合し、蛍光共鳴メネルギー転移(FRET)を応用してIP_3の可視化を試みた。
5.GFP-VAMP-2, GFP-SNAP-23およびGFP-Syntaxin-4をHSY細胞に発現させ、これらの蛋白質の細胞内動態を観察した。Syntxin-4の結合蛋白質であるMunc18cはSyntaxin-4の細胞膜への輸送に重要な役割を果たしていることが示唆された。
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