プロスタグランジン受容体の生物薬学的研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470496
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 市川 厚 京都大学, 薬学研究科, 教授 (10025695)
• 研究分担者: 田中 智之 京都大学, 薬学研究科, 助手 (40303846) ; 杉本 幸彦 京都大学, 薬学研究科, 助教授 (80243038)
• キーワード: プロスタグランジン受容体 / Gタンパク質 / EP3受容体 / EP2受容体 / トロンボキサン受容体 / シクロオキシゲナーゼ

研究概要

種々の疾患において、プロスタグランジン(PG)の合成や受容体を介する生体調節作用の障害が認められるが、受容体選択性の高い薬物は現在、ほとんど開発されていない。そこで、医薬品化学分野でのPG受容体選択的薬物の開発に有効な基礎的知見、また、PGに関する未知の課題を見いだすことを目的として検討を行い、以下の成果を得た。
1)PG受容体の構造活性相関の解析
PGE_2受容体EP3サブタイプについては、これまでにGiおよびG_<12,13>と共役することを報告しているが、最近、Gs共役型受容体のGs活性を促進するスーパーアクティベーション作用のあることを見いだした。そこで、多様なGタンパク質との共役に必要な受容体サイトゾル側のペプチド配列の同定を目的として、Gs共役型モデルのEP2受容体とのキメラEP3受容体を作成し、検討中である。
2)PG受容体を認識する抗体の作製と細胞発現
各種プロスタノイド受容体サブタイプに対して抗体を作製し、トロンボキサンA_2受容体TPに対する特異的抗血清を得た。他の受容体抗血清に関しても検討中である。また、各受容体にエピトープタグを導入した安定発現細胞株も作製中である。この検討において、今年度購入した倒立顕微鏡を用いた。
3)受容体遺伝子欠損マウスを用いる生体作用の解析
ともにGsに共役するEP2およびEP4受容体サブタイプの遺伝子欠損マウスを用いて、腹腔浸潤好中球によるサイトカイン(IL-6、TNF-α)産生に対して両者が機能を分担することを見いだした。また、PGF_<2α>受容体FP欠損マウスを用いて、分娩時の子宮収縮に関与するPG産生に関与するシクロオキジゲナーゼ(COX)がCOX-2であることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Ikegami,R., et al.: "The expression of prostaglandin E receptors EP2 and EP4 and their different regulation by LPS in C3H/HeN peritoneal macrophages."J.Immunol.. (in press). (2001)
• [文献書誌] Yamane,H., et al.: "Prostaglandin E2 receptor, EP2 and EP4, differentially modulate TNF-a and IL-6 production induced by lipopolysaccharide in mouse peritoneal neutrophils."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 278. 224-228 (2000)
• [文献書誌] Matsuoka,T., et al.: "Prostaglandin D2 as a mediator of allergic asthma."Science. 287. 2013-2017 (2000)
• [文献書誌] Sugimoto,Y., et al.: "Distribution and function of prostanoid receptors : studies from knockout mice."Jpn.J.Pharmacol.. 83. 279-285 (2000)
• [文献書誌] Croy,B.A., et al.: "Prolonged gestation does not extend survival of uterine natural killer lymphocytes in mice deleted in the receptor for prostaglandin F_<2α>"J.Reprod.Immunol.. 46. 125-129 (2000)
• [文献書誌] Tsuboi,K., et al.: "Uterine expression of prostaglandin H_2 synthase in late pregnancy and during parturition in prostaglandin F receptor-deficient mice."Endocrinology. 141. 315-324 (2000)