HNK-1抗原の生合成に関与するグルクロン酸転移酵素とその機能に関する研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470497
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 川嵜 敏祐 京都大学, 薬学研究科, 教授 (50025706)
• 研究分担者: 岡 昌吾 京都大学, 薬学研究科, 助教授 (60233300)
• キーワード: HNK-1抗原 / グルクロン酸転移酵素 / mRNA / 染色体遺伝子

研究概要

代表者らはすでにラット脳cDNAライブラリーよりHNK-1糖鎖抗原の生合成に関わる二種のグルクロン酸転移酵素(GlcAT)のクローニングに成功しこれをGlcAT-PおよびGlcAT-Sと名付け、それぞれについて生化学的、細胞生物学的研究を進めている。本年度の研究においてはヒトGlcAT-P遺伝子を初めてクローニングし、本酵素が334アミノ酸残基よりなるII型の膜タンパク質であること、また、そのゴルジ内腔側に位置する触媒ドメインはラットGlcAT-Pと6個のアミノ酸が異なるのみで、98.2%のアミノ酸相同性を示すこと、しかし、細胞質ドメインにはヒト酵素はラット酵素に対して13個短い特徴を示すことを明らかにした。また、全長cDNAを用いたnorthern blot分析の結果、GlcAT-PmRNAはラットの場合同様に、神経系組織に高発現がみられ、心臓、腎臓、膵臓、筋肉などには見られなかったが、肝臓にも明瞭なシグナルが検出された。この肝臓での発現はラットにはみられない特徴的なものであり、その意義の解明は今後の検討にまたねばならないが、免疫系細胞に発現するHNK-1糖鎖抗原の生合成に関与するものかもしれない。Genomic southern blot解析の結果は、ヒトGlcAT-P遺伝子はシングルコピー遺伝子であることを示していたので、次に、本遺伝子の染色体上での位置をFISH法により決定した、その結果、11番染色体の11q25に位置することが決定された。

研究成果

• [文献書誌] S.Oka et al.: "The N-glycan acceptor specificity of a glucuronyltransferase, GlcAT-P, associated with biosynthesis of the HNK-1 epitope."Glycoconjugate J.. (in press). (2001)
• [文献書誌] R.Katsuyama et al.: "Expression of macrophage asialoglycoprotein-binding protein is induced through MAPK classical pathway."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 280(5). 1269-1273 (2001)
• [文献書誌] Y.Mitsumoto et al.: "Cloning and chromosomal mapping of human glucronyltransferase involved in biosynthesis of the HNK-1 carbohydrate epitope."Genomics. 65(2). 166-173 (2000)
• [文献書誌] K.Ohtsubo et al.: "Studies on the structure-function relationship of the HNK-1 associated glucuronyltransferase, GlcAT-P, by computer modeling and site directed mutagenesis."J.Biochem.. 128(2). 283-291 (2000)
• [文献書誌] T.Kanazawa et al.: "Inhibition of cytokinesis by a lipid metabolite, psychosine."J.Cell Biol.. 149(4). 943-950 (2000)
• [文献書誌] T.Seiki et al.: "Molecular cloning and expression of a second glucuronylt ransferase involved in the biosynthesis of the HNK-1 carbohydrate epitope."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 255(1). 182-187 (1999)