スフィンゴシン1-リン酸の細胞外動態と受容体サブタイプ特異的応答機構

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12480185
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 岡島 史和 群馬大学, 生態調節研究所, 教授 (30142748)
• 研究分担者: 佐藤 幸市 群馬大学, 生態調節研究所, 助手 (00302498)
• キーワード: スフィンゴシン1-リン酸 / リポ蛋白質 / 内皮細胞 / グリア細胞 / MAPキナーゼ / Edg / S1P定量 / 脂質メディエーター

研究概要

本研究では新規の脂質メディエーターであるスフィンゴシン1-リン酸(S1P)の機能とその作用機構の他、新規S1P定量法を確立し、その血中分布を調べた。その結果
(1)S1P新規受容体の同定:以前よりリガンドが不明であったEdg-6を新規のS1P受容体と同定した。その結果、現在Edg-1、-3、-5、-8をふくめ5種のサブタイプの存在が明らかにされた。
(2)血管内皮細胞ではEdg-1、-3が発現しており、S1PはErkを介し細胞増殖、p38MAPキナーゼを介し細胞遊走を促進すること、また、いずれの応答も百日咳毒素処理で抑制されることを明らかにした。このように、S1Pによる細胞増殖、細胞遊走はG蛋白質をし、異なったMAPキナーゼ系を介していると推定された。
(3)C6グリア細胞ではEdg-1、-5が発現しているが、それぞれがErk/FGF2発現系、ホスホリパーゼC/D系の活性化と連関しており、S1P受容体サブタイプの機能分担が明らかにされた。
(4)新規S1P定量法の開発と血中S1P分布等を調べた。本定量法により血漿、血清の他、組織、培養細胞中のS1P量が従来法に比べ極めて簡便に測定可能になった。また、血中ではHDLなどのリポ蛋白質中に濃縮していることが判明した。
このように、S1Pはリポ蛋白質に濃縮している。HDL、LDL、酸化LDLは循環器疾患との関連が指摘されており、今後、(1)リポ蛋白質中作用におけるS1Pの役割を明らかにしたい。(2)複数S1P受容体の機能分担に関してもさらに研究を発展させたい。(3)S1P定量法の応用研究として、血小板からのS1P放出機序、血中S1P濃度変化と病態との関連等を明らかにしたい。

研究成果

• [文献書誌] Yuji Yamazaki: "Edg-6 as a Putative Sphingosine 1-phosphate Receptor Couping to Ca2+ Signaling Pathway."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 268. 583-589 (2000)
• [文献書誌] Takao Kimura: "Sphingosine 1-phosphate stimulates proliferation and migration of human endothelial cells possibly through the lipid receptors, Edg-1 and Edg-3"Biochem.J.. 348. 71-76 (2000)
• [文献書誌] Koichi Sato: "Differential roles of Edg-1 and Edg-5, sphigosine 1-phosphate receptors, in the signaling pathways in C6 glioma cells."Mol.Brain Res.. 85. 151-160 (2000)
• [文献書誌] Naoya Murata: "Quantitative measurement of sphinogosine 1-phosphte by radio-receptor binding assay."Anal.Biochem.. 282. 115-120 (2000)
• [文献書誌] Hiroyuki Shimizu: "Sphingosine 1-phosphate stimulates insulin secretion in HIT-T 15 cells and mouse islets"Endocrine J.. 47. 261-269 (2000)
• [文献書誌] Naoya Murata: "Interaction of sphingosine 1-phosphate with plasma components, including lipoproteins, regulates the lipid receptor-mediated actions."Biochem.J.. 352. 809-815 (2000)