ヘリコバクターカタラーゼによる胃癌予防ワクチン開発の基礎的研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12557050
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 杉山 敏郎 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (00196768)
• 研究分担者: 平山 文博 吉富製薬, 開発研究所, 主任研究員 ; 浅香 正博 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10113507)
• キーワード: H.pylori / カタラーゼ / ワクチン / 胃癌

研究概要

H.pyloriは慢性萎縮性胃炎、胃癌の主要な病因と考えられ、その関連性、因果関係は疫学的、動物実験モデルにより実証されつつある.我が国のH.pylori感染者は5000-6000万人と推定されているが、胃癌予防のために感染者をすべて除菌することは現実的に、また医療経済上も不可能である.したがって、予防ワクチンの開発は重要である.さらに開発途上国では胃癌患者はいまだ増加傾向にあり、かつ多数のH.pylori感染者を除菌治療することは経済的に全く不可能であり、一層、予防ワクチンの開発が必要とされる.本研究ではH.pyloriリコンビナントカタラーゼ蛋白をワクチンとして用い、スナネズミを免疫し、その後、胃癌を高頻度に発症するH.pylori菌株を感染させ、感染の成立、胃炎の成立、そして胃癌発症予防効果を検討した.H.pyloriリコンビナントカタラーゼを精製し、5週令のSPFスナネズミにリコンビナントカタラーゼ蛋白およびアジュバントとともに免疫し、その後、採血および胃液を採取、ELISA法により血清IgG抗体および胃液IgA抗体の上昇を確認した.免疫の成立を確認した後、胃癌高頻度発生H.pylori菌(TN2GF4株)液を経管的にスナネズミに投与し、さらに10ppmのメチルニトロソウレアを20週間投与し、経時的に観察し、胃癌の発生を評価しているが現時点ではいまだ十分な比較ができていない.一方、我々がクローニングしたH.pyloriカタラーゼ遺伝子をカナマイシンカセットに導入しH.pyloriに遺伝子導入し、菌体内でリコンビネーションによりカタラーゼノックアウトH.pyloriを作成し5週令SPFスナネズミ15匹に感染させたが、感染は全く成立せず、カタラーゼは感染成立に必須であることも判明している.したがってH.pyloriリコンビナントカタラーゼが感染予防ワクチンとして有望であることも判明した.研究はおおむね予定どおり進行している.

研究成果

• [文献書誌] Higashi H, Sugiyama T, et al.: "SHP-2 tyrosine phosphatase as an intracellular target of H.pylori CagA protein"Science. 295. 683-686 (2002)
• [文献書誌] Mizushima T, Sugiyama T. et al.: "Decreased adherence of cagG deleted Helicobacter pylori to gastric epithelial cells in Japanese clinical isolates"Helicobacter. 7(in press). (2002)
• [文献書誌] Mizushima T, Sugiyama T. et al.: "Clinical relevance of the babA2 genotype of Helicobacter pylori in Japanese clinical isolates"J Clin Microbil. 39. 2463-2465 (2001)
• [文献書誌] Sugiyama T. et al.: "Attributable risk of H.pylori in peptic ulcer diseases : Does the declining prevalence of infection in general population explain the increasing frequency of non-H.pylori ulcer?"Dig Dis Sci. 46. 307-310 (2001)
• [文献書誌] Sugiyama T. et al.: "API2-MALT1 chimeric transcript is a predictive marker for the responsiveness of H.pylori eradication treatment in low-grade gastric MALT lymphoma"Gastroenterology. 120. 1884-1885 (2001)
• [文献書誌] Kawahara T, Sugiyama T et al.: "Type I Helicobacter pylori lipopolysaccharides stimulates Toll-like receptor 4 and activates mitogen oxidase 1 in gastric pit cells"Infect Immune. 69. 4382-4389 (2001)