造血器悪性腫瘍に対する新たな免疫遺伝子治療の開発

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12557081
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 安川 正貴 愛媛大学, 医学部, 助教授 (60127917)
• 研究分担者: 薬師神 芳洋 愛媛大学, 医学部, 助手 (30294797) ; 酒井 郁也 愛媛大学, 医学部, 助手 (10205700)
• キーワード: 白血病 / 悪性リンパ腫 / 免疫療法 / 遺伝子治療 / 細胞傷害性T細胞 / HLA / WT1 / hTERT

研究概要

白血病や悪性リンパ腫などの造血器悪性腫瘍に対する免疫遺伝子治療の開発の目的で研究を遂行し、以下の結果が得られた。
1)転写因子であるWT1はほとんどの白血病細胞で高発現されているが正常細胞にはほとんど発現されていないことから、WT1は白血病免疫療法の理想的標的抗原と考えられた。そこでWT1由来ペプチドを作製し、WT1特異的HLA-A24拘束性CD8陽性細胞傷害性T細胞(CTL)クローンを樹立した。このCTLクローンは白血病細胞に対してHLA-A24拘束性に細胞傷害性を示すことが示された。
2)同様に、hTERTが広く悪性腫瘍細胞に高発現していることから、HLA-A24アンカーモチーフを有するhTERTペプチド特異的CTLクローンを樹立し、造血器悪性腫瘍細胞に対する細胞傷害性を検討した。その結果、hTERT特異的CTLは白血病細胞をHLA-A24拘束性に傷害することが明らかとなった。
3)WT1特異的ならびにhTERT特異的CTLクローンにHerpesvirus saimiri(HVS)を接種し、HVSによってこれらのT細胞クローンを不死化させた。不死化CTLは、本来の機能を維持したまま長期間の培養が可能であった。
4)Herpes simplex virus thymidine kinase(TK)遺伝子をレトロウイルスベクターを用いて不死化CTLに導入した。現在、TK遺伝子導入不死化CTLの生体内での白血病細胞増殖抑制効果とガンシクロビルによる人為的排除を、ヒト白血病細胞移入SCIDマウスの実験系で検討中である。
以上の結果は、造血器悪性腫瘍の新たな免疫遺伝子治療の開発につながるものと考えられ、さらに検討を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Hasegawa A.,Yasukawa M., et al.: "Transcriptional down-regulation of CXCR4 induced by impaired association of transcription regulator YY1 with c-Myc in human herpesvirus 6-infected cells"Journal of Immunology. 166. 1125-1131 (2001)
• [文献書誌] Arai J.,Yasukawa M., et al.: "Identification of human telomerase reverse transcriptase-derived peptides which induce HLA-A24-restricted anti-leukemia cytotoxic T lymphocytes"Blood. (in press). (2001)
• [文献書誌] Arai J.,Yasukawa M., et al.: "Stromal cells in lymph nodes attract B-lymphoma cells via production of stromal cell-derived factor-1"European Journal of Haematology. 64. 323-332 (2000)
• [文献書誌] Yasukawa M., et al.: "Analysis of HLA-DRB1 alleles in Japanese patients with chronic myelogenous leukemia"American Journal of Hematology. 63. 99-101 (2000)
• [文献書誌] Yasukawa M., et al.: "Granule exocytosis, and not Fas/Fas ligand system, is the main pathway of cytotoxicity mediated by alloantigen-specific CD4+ as well as CD8+ cytotoxic T lymphocytes in humans"Blood. 95. 2352-2355 (2000)
• [文献書誌] Ohminami H.,Yasukawa M., et al.: "HLA class I-restricted lysis of leukemia cells by a CD8+ cytotoxic T-lymphocyte clone specific for WT1 peptide"Blood. 95. 286-293 (2000)
• [文献書誌] 安川正貴: "白血病・リンパ腫・骨髄腫"押味和夫 編集 中外医学社. 81-98 (2000)
• [文献書誌] 安川正貴: "血液疾患診療マニュアル"池田康夫,押味和夫,朝長万左男,堀田知光 編集 日本医師会. 311-312 (2000)