PPARγ内因性リガンド同定による肥満・インスリン抵抗性の新規診断・治療法の開発

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12557093
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 門脇 孝 東京大学, 医学部・附属病院, 助教授 (30185889)
• 研究分担者: 原 一雄 東京大学, 医学部・附属病院, 医員 ; 戸辺 一之 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (30251242) ; 山内 敏正 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
• キーワード: PPARγ / 内因性リガンド / インスリン感受性 / 脂肪細胞分化 / PPARγヘテロ欠損マウス / Pro12Ala遺伝子多型 / 3T3L1脂肪細胞 / PPARγアンタゴニスト

研究概要

脂肪細胞分化に伴ってインスリン感受性を獲得する3T3L1脂肪細胞より内因性PPARγリガンドの精製を行った。PPARγ ligand binding domain(LBD)に対するアフィニティーカラムを用いて脂溶性の分画を精製した。この脂溶性分画をHPLCにより分離し、PPARγ LBDに対する転写活性化能を測定して精製をすすめた。この方法により、精製したHPLC上の単一のピークは脂肪細胞分化が生じない種々の条件では認められず、また脂肪細胞分化の程度が減弱する種々の条件でその量が減少する事より、脂肪細胞分化とリンクしたリガンドであると考えられた。これは従来知られている内因性リガンド(15d-△^<12,14>PGJ_2etc)とHPLC上異なったretention timeを持つ事、及びPPARγ LBD内に変異を持つ種々のmutantとの反応性が異なる事により、新規の分子であると考えられた。このリガンドはロジグリタゾン以上の活性化能を有すると考えられた。一方、in vivoにおいてはPPARγヘテロ欠損マウスの我々の解析より(Mol.Cell4:597-609,1999)高濃度の内因性リガンドは脂肪細胞分化が起こる発生段階に存在する可能性が示唆されていた。マウスの場合、白色脂肪細胞の分化が起こり、組織として形成される3日齢において実際に他の時期より高い内因性PPARγリガンド活性が認められた。これらとは別に我々はPPARγ遺伝子の活性が高いPro12多型保持者は肥満、糖尿病に対する疾患感受性が高いこと、及びPPARγアンタゴニストが原因に基づいた新規治療薬となり、2型糖尿病モデルマウスの肥満・糖尿病を改善させうることを明らかにした(BBRC271:212,2000,JCI106:459,2000)。

研究成果

• [文献書誌] Okada,T., et al.: "Variants of neurogenis 3 gene are not asoociated with type 2 diabetes in Japanese subjects."Diabetologia. 44. 241-244 (2001)
• [文献書誌] Kato,H, et al.: "Mechanism of amelioration of insulin resistance by β-3-adrenoceptor agonist AJ-9677 in KK-Ay/Ta obese diabetic mice."Diabetes,. 50. 113-122 (2001)
• [文献書誌] Hara,K., et al.: "The role of PPARγ as a thrifty gene in both in mice and humans."Brit.J.Nutr.. 84. 235-239 (2001)
• [文献書誌] Murakami,K., et al.: "Fatty Acyl-CoA thioesters are antagonists for α and γ isoforms of peroxisome proliferators-activated receptors."Biochem.J.. 353. 1-10 (2000)
• [文献書誌] Kubota,N., et al.: "Disruption of insulin receptor substrate-2 causes type 2 diabetes due to liver insulin resistance and lack of compensatory β-cell hyperplasia."Diabetes. 49. 1880-1889 (2000)
• [文献書誌] Kadowaki,T., et al.: "Molecular pathogenesis of type 2 diabetes and obesity in knockout mice models."J.Clin.Invest.. 106. 459-465 (2000)
• [文献書誌] Hara,K., et al.: "A Pro12Ala polymorphism in PPARγ2 may confer resistance to type II diabetes."Biochem.Biophys.Res. Commun.. 271. 212-216 (2000)
• [文献書誌] Terauchi,Y., et al.: "Insulin effect during embryogenesis determines fetal growth.: a possible molocular link between birth weight and susceptibility to type 2 diabetes."Diabetes. 40. 82-86 (2000)