アポリポ蛋白質受容体刺激による細胞コレステロール搬出促進効果の評価モデルの確立

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12557095
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 横山 信治 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (10142192)
• 研究分担者: 辻田 麻紀 名古屋市立大学, 医学部, 助手 (10253262) ; 堂前 純子 名古屋市立大学, 医学部, 講師 (70227700) ; 伊藤 仁一 名古屋市立大学, 医学部, 助教授 (60167260) ; 青塚 知士 グレラン製薬開発研究所, 化学研究グループ, 課長
• キーワード: コレステロール / HDL / リポタンパク質 / アポリポタンパク質 / ABCA1 / カペオリン

研究概要

HDL低下薬剤probucolによるHDL新生反応の阻害をマウスのin vivoで再現し、この反応がHDLの主要な生成源であることを証明した(BBA 1485:199,2000)。臓器により細胞コレステロール放出の二つの搬出系の貢献度をLCAT欠損マウスへのprobucol投与により検討した。特異的コレステロールの蓄積は肝においてのみ認められ、肝がHDL新生の主要な臓器であることが分かった(Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.in press)。マウス単球白血病細胞RAW264でcAMPによるHDL新生の誘導とABCA1の発現を検討した。cAMPによるHDL新生反応はアポリポ蛋白質の細胞表面への結合の発現と平行し、DNAチップによる解析でABCA1のmRNAはcAMPにより10倍以上増加した(Biochemistry 39:11092,2000)。反応に連動した細胞内コレステロール輸送を、PMAにり分化するヒト単球白血病細胞THP-1で検討すると、分化前のTHP-1細胞はアポリポ蛋白質と反応してコレステロールを含まないHDLを産生し、分化後はコレステロールに富むHDLを新生する。この時、ABCA1とcaveolin-1発現が誘導され、cveolin-1のアンチセンスDNA処理でHDL中のコレステロールが特異的に減少する。これらから、HDLの新生反応にはABCA1は必須ではなく、コレステロールをHDLに組み込むcaveolin-1の役割が示された(J.Lipid Res.41:1952,2000)。アストログリア細胞を用いてHDL新生反応の場として膜ラフトが示唆された(J.Lipid Res.41:894,2000)。以上の結果と見解は報告者の総説において言及・整理されている(BBA 1529:231,2000)。

研究成果

• [文献書誌] Jin-ichi Ito and Shinji Yokoyama.: "Sialosylcholesterol induces reorganization of astrocyte filament network."Biochim.Biophys.Acta. 1495. 195-202 (2000)
• [文献書誌] Jin-ichi Ito, et al: "Cholesterol-sphingomyelin interaction in membrane and apolipoprotein-mediated cellular cholesterol efflux."J.Lipid Res.. 41. 894-904 (2000)
• [文献書誌] Maki Tsujita, et al: "Apolipoprotein-mediated cellular cholesterol/phospholipid efflux and plasma high density lipoprotein level in mice."Biochim.Biophys.Acta. 1485. 199-213 (2000)
• [文献書誌] Koon K.Teo, et al.: "Montague on behalf of the SCAT investigators.Long term effects of cholesterol lowering and angiolensin-converling enzyme inhibition on coronary atherosclerosis : The Simyaslatin/Enalapril Coronary Atheroscierosis Trial (SCAT)."Circulation. 102. 1748-1754 (2000)
• [文献書誌] Sumiko Abe-Dohmae, et al.: "Characterization of apolipoprotien-mediated HDL generation induced by cAMP in a murine macrophage cell line."Biochemistry. 39. 11092-11099 (2000)
• [文献書誌] Reijiro Arakawa, et al: "Involvement of caveolin-1 in cholesterol-enrichment of HDL during its assembly by apolipoprotein and THP-1 cells."J.Lipid Res.. 41. 1952-1962 (2000)
• [文献書誌] Shogo Suzuki, et al: "Enhancement of the cAMP-induced apolipoprotein A-1-mediated cellular lipid release by calmodulin inhibitors W7 and W5 from RAW 264 mouse macrophage cell line cells."J.Cardiovasc.Pharmacol.. 36. 609-616 (2000)
• [文献書誌] Shinji Yokoyama.: "Release of cellular cholesterol : Molecular mechanism for cholesterol homeostasis in cells and in the body."Biochim.Biophys.Acta. 1529. 231-244 (2000)
• [文献書誌] Li-Yong Zhang,Jin-ichi Ito,Taiji Kato and Shinji Yokoyama.: "Cholesterol homeostasis in rat astrocytoma cells GA-1."J.Biochem.. 128. 837-845 (2000)
• [文献書誌] Shigehiro Tomimoto, et al: "Effect of probucol in lecithin-cholesterol acyltransferase deficient mice : Inhibition of two independent cellular cholesterol releasing pathways in vivo."Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. (in press). (2001)
• [文献書誌] Akitomo Goto, et al: "Cholesteryl ester transfer protein and atherosclerosis in Japanese subjects : A study based on coronary angiography."Atheroscelrosis. (in press). (2001)