新規熱ショック蛋白質誘導剤の肝移植への応用

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12557105
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 六反 一仁 徳島大学, 医学部, 助教授 (10230898)
• 研究分担者: 杉田 尚久 田辺製薬(株), 創薬研究所, 主任研究員 ; 田代 征記 徳島大学, 医学部, 教授 (30040249)
• キーワード: 熱ショック蛋白質70 / シャペロン誘導剤 / geranylgeranylacetone / geranylgeraniol / テルペン化合物 / 肝移植 / 肝阻血・再還流傷害 / アポトーシス

研究概要

本研究は、申請者らが安全な熱ショック蛋白質誘導剤として初めて報告した非環状イソプレノイドgeranylgeranylacetone(GGA)をリード化合物として、肝移植に応用できるより強力な化合物を見いだすことを目的としている。平成12年度に14種類選び出した非環状イソプレノイドの中からgeranylgeraniol(GGO)が最も強力な熱ショック蛋白質誘導剤であることを見いだした。これらの成果をもとに、各研究者は平成13年度に以下の研究成果をあげた。
六反(研究代表者):ラット培養肝細胞を用いてGGOの細胞保護作用を検討した。GGOを前処理した肝細胞は、エタノール及び過酸化水素によるアポトーシスを抑制した。この作用は、主にミトコンドリアに対する保護作用に由来することを突き止めた。また、ラット阻血・再還流傷害モデルにおいても、GGOはGGAに比べて、肝臓からのLDHとGPTの逸脱及び血中の炎症性サイトカイン(IL-6,TNF-α)の産生をより強力に抑制することを確認した。
田代(研究分担者):12年度に、ラットを用いてGGOの至適投与量と投与方法を決定した。この結果をもとに、ラット肝移植モデルを確立し、温阻血の時間等を含めた条件設定のための実験を行った。現在、症例数を増やし、GGOの効果判定の作業を行っている。
杉田(研究分担者):GGOの体内動態と毒性に関する動物実験を終了した。また、GGOを肝移植の他に、腎移植へ応用できる可能性を探るため、右腎摘出ラットを用いて、左腎の45分間腎阻血・再還流実験を行い、GGO 300mg/kgの一回投与で、腎不全の進行を完全に抑制することを見いだした。この結果から、GGOは腎移植時の保護剤として使用できる可能性を示した。
以上、ラット肝移植モデルにおけるGGOの効果判定には少し時間を要するが、その他の研究計画はほぼ順調に消化した。

研究成果

• [文献書誌] Oda H, et al.: "Geranylge ranylacetone suppresses inflammatory responses and improves survival after massive hepatectomy in rats"J. Gastrointest. Surg.. (in press). (2002)
• [文献書誌] Ikeyama S, et al.: "A non-toxic heat shock protein 70 inducer, geranylgeranylacetone, suppresses apoptosis of cultured rat hepatocytes caused by hydrogen peroxide and ethanol"J. Hepatol.. 35・1. 53-61 (2001)
• [文献書誌] Tomisato W, et al.: "NSAIDs induce both necrosis and apoptosis in guinea pig gastric mucosa in primary culture"Am. J. Physiol.. 281・4. G1092-G1100 (2001)
• [文献書誌] Tsutsumi S, et al.: "Gastric irritant-induced apoptosis in guinea pig gastric mucosal cells in primary culture"Biochim Biophys. Acta,. (in press). (2002)
• [文献書誌] Kawahara T, et al.: "Type I Helicobacter pylori lipopolysaccharide stimulates Toll-like receptor 4 and activates mitogen oxidase 1 in gastric pit cells"Infect. Immun.. 69・7. 4382-4389 (2001)
• [文献書誌] Kawahara T, et al.: "Helicobacter pylori lipopolysaccharide induces apoptosis of cultured guinea pig gastric mu cosal cells"Am. J. Physiol.. 281・3. G726-G734 (2001)