子宮内膜の増殖及び発癌機構の解明と治療法の開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12557138
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 加藤 聖子 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (10253527)
• 研究分担者: 和氣 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606)
• キーワード: Ras / ER / 造腫瘍性 / 細胞老化

研究概要

活性化型K-Rasにより造腫瘍能を獲得したNIH3T3細胞をモデルに、発癌に重要なシグナル伝達を明らかにし、子宮体癌、卵巣癌の分子標的治療への応用を試みた。
方法は、1)活性化型K-Ras, dominant negative estrogen receptor(DNER)を単独にまたは共に発現するNIH3T3細胞(K12V細胞、K12VDNER細胞)を樹立し、細胞増殖能を解析した。2)各蛋白の発現をウエスタンブロット法で、ER、p53転写活性をルシフェラーゼアッセイで解析した。3)野生型p53を発現する子宮体癌(Hec6、HHUA)、卵巣癌細胞株(PA-1、KF)のER機能をMEK阻害剤(AF-1機能を阻害)、抗エストロゲン剤(AF-2機能を阻害)で抑制し増殖能、mdm2の発現量を解析した。
以上の解析により以下の結果を得た。
1)造腫瘍能を獲得したK12V細胞はERαの機能が亢進していた。K12VDNER細胞では造腫瘍能は消失しp53依存性、p21依存性、p16非依存性の細胞老化が誘導された。
2)K12V細胞ではmdm2の発現、MDM2とp53との結合はmock細胞に比べ亢進していたが、DNERの発現によりこの亢進は抑制された。
3)子宮体癌、卵巣癌細胞株にMEK阻害剤と抗エストロゲン剤を投与すると増殖能はそれぞれの単独投与では有意差がなかった細胞株も、同時投与では著明に抑制された。この時p14ARFの発現が欠失した細胞株でmdm2の発現抑制がみられた。

研究成果

• [文献書誌] Kato K et al.: "Contribution of estrogen receptora (ERα) to oncogenic K-Ras-mediated NIH3T3 cell transformation and its implication for escape from senescence by modulating the p53 pathway"J. Biol. Chem. 277,13,. 11217-11224 (2002)
• [文献書誌] Kato H et al.: "Growth-associated Gene Expression Profiles by Microarray Analysis of Trophoblast of Molar Pregnancies and Normal Villi"International Journal of Gynecological Pathology. 21,3. 255-260 (2002)
• [文献書誌] Zhou Y et al.: "Identification of FOXC1 as a TGF-β1 responsive gene and its involvement in negative regulation of cell growth"Genomics. 80,5. 465-472 (2002)
• [文献書誌] Kato K et al.: "Contribution of estrogen receptor α and progesterone receptor-B to oncogenic K-Ras-mediated NIH3T3 cell transformation"Cell and Molecular Biology of Endometrial Carcinoma : Springer-Verlag Tokyo. (in press).
• [文献書誌] Ueoka Y et al.: "Hepatocyte growth factor modulates motility and invasiveness of ovarian carcinomas via Ras mediated pathway"Molecular and cellular endocrinology. (in press).