| 研究課題/領域番号 |
12557184
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
日野出 大輔 徳島大学, 歯学部, 助教授 (70189801)
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| 研究分担者 |
田部 慎一 徳島大学, 歯学部, 助手 (40284301)
増田 かなめ 徳島大学, 歯学部, 助手 (30243710)
吉岡 昌美 徳島大学, 歯学部・附属病院, 講師 (90243708)
福井 誠 徳島大学, 歯学部・附属病院, 助手 (50325289)
横山 正明 徳島大学, 歯学部・附属病院, 助手 (10314882)
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| キーワード | 熱ショック蛋白質 / 唾液 / 分泌型IgA / 抗体価測定 / 病態パラメーター / 歯周病原性細菌 / Campylobacter rectus / 遺伝子解析 |
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| 研究概要 |
現在、徳島大学歯学部附属病院予防歯科を受診した患者で、本研究への参加同意のもとに得られた唾液サンプルが100検体近く集まり、各サンプルの基本的な性状(分泌量、タンパク量、分泌型IgA量)については測定済みである。データは各被験者の歯周病の病態パラメーターとあわせてコンピューターへ入力している。検体の収集は次年度も行っていく予定である。一方、熱ショック蛋白質(HSP)抗体価測定のために使用する抗原は、以前確立した方法にて直接各歯周病原性細菌より抽出した。これを利用して検体中のHSPに対する抗体価を測定する準備を行っている。
また、迅速測定法を確立するための抗原として多くの抗原蛋白質を必要とするため、リコンビナントHSPを作成する必要がある。本年度はまず、Campylobacter rectus GroEL様蛋白質の遺伝子解析を試みた。この蛋白質のN末端アミノ酸配列からセンスプライマーを、他の細菌とも相同性の高いC末端側配列からアンチセンススプライマーを設計した。C.rectusゲノムDNAを鋳型としてPCRを行い、増幅産物をダイ・ターミネーター法により核酸配列を調べた結果、547のアミノ酸をコードしていることが明らかとなった。現在、この情報をもとにしてリコンビナント蛋白質作成に取りかかっている。
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