| 研究課題/領域番号 |
12557187
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
井上 昌一 鹿児島大学, 歯学部, 教授 (30028740)
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| 研究分担者 |
軒原 清史 島津総合科学研究所, 主席研究員 (60137073)
伊藤 博夫 鹿児島大学, 歯学部, 助教授 (40213079)
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| キーワード | ペプチドライブラリー / デコンボルーション / 口腔細菌 / 感染性心内膜炎 / フィブロネクチン / モノクローナル抗体 / ポジションスキャン |
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| 研究概要 |
感染性心内膜炎は、血流中に偶然侵入した微生物が患者の心内膜に定着し増殖することにより成立する。種々の細菌の心内膜への定着に、宿主のフイブロネクチン(Fn)への付着能が関与することが示唆されている。本研究の達成目標は、Granulicatella adiacensが表現するFn結合性物質をモデルとして、種々の細菌種による心内膜炎の発症を抑制する低分子化合物を探索することである。本年度の研究において、井上と伊藤はG.adiacensのFnへの付着を阻止する抗Fnモノクローナル抗体(mAb)の樹立に成功した。一方、軒原は約6000万種のへキサペプチドから構成される、1粒の固相担体には1種類のみのペプチドが固定されているランダム・ペプチド・ライブラリーを構築した。そこで、この抑制性mAbの認識するFn上のエピトープを表現するペプチドを決定すべく、mAb反応性のビーズをスクリーニングした。選択されたビーズ上のペプチドの一次構造解析に関しての効果的な手法はまだ知られていない。このため、アミノ酸配列解析を従来のエドマン分解を用いる手法に加えて、より高効率ハイスループット法の開発に軒原は取り組んだ。これと平行して軒原は、ポジション・スキャニング・ライブラリーを構築した。このライブラリーは特定位置に特定アミノ酸を擁するためランダムライブラリーに比べてターゲット配列の推定がより確実であり、二次ライブラリーの検討が効率よく行いうる。井上と伊藤はこのライブラリー中からFnに付着することによって菌の付着を抑制する、すなわち菌表層のFn結合性物質を模倣するものを見い出すべくスクリーニングを行い、さらに先にランダム・ペプチド・ライブラリーを用いて得られた配列との相補性からターゲット候補をより絞った二次ライブラリー構築へ進める予定である。
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