2000 年度実績報告書

温度感受性SV40T抗原遺伝子導入ラットを用いた血液網膜関門培養細胞実験系の開発

研究課題

研究課題/領域番号	12557226
研究機関	富山医科薬科大学
研究代表者	細谷健一富山医科薬科大学, 薬学部, 教授 (70301033)
研究分担者	河津剛一参天製薬, 眼科研究所・動態研究グループ, マネージャー帯刀益夫東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (10099971) 片山和憲富山医科薬科大学, 薬学部, 助教授 (70126514)
キーワード	血液網膜関門 / 眼 / 条件的不死化細胞株 / ペリサイト株 / α-smooth muscle actin / intercellular adhesion molecule-1
研究概要	温度感受性SV40T抗原遺伝子導入トランスジェニックラットから条件的不死化網膜毛細血管ペリサイト株(TR-rPCT)を樹立することを目的とした。tsA58 TG rat 3匹から候補株TR-rPCTを10株単離した。これらクローンは節状の多重層形態を示したこと、および節状部位がvon Kossa染色によって陽性であったことから、ペリサイトの特性を示した。さらにRT-PCR法によって、intercellular adhesion molecule-1が検出されたことから平滑筋細胞へ分化していないこと、angiopoietin-1およびplatelet derived growth factor receptor βが検出されたことから脈管形成時に必須のin vivoマーカーを保持していることが示唆された。In vivoの網膜毛細血管ペリサイトはα-smooth muscle actin(α-SMA)を発現していないが、in vitroではtransforming growth factor β1(TGF β1)によってα-SMAが発現誘導されること、basic fibroblast growth factor(bFGF)によって発現抑制されることが報告されている。Western blot法によってα-SMAの発現を解析したところ、TR-rPCT1について未処理条件ではα-SMAが検出されなかったが、TGF β1処理条件ではα-SMAが検出され、さらにbFGF処理条件ではα-SMAが検出されなかった。従って、TR-rPCT1は網膜毛細血管ペリサイトのin vivoおよびin vitroの特性を保持した細胞株であることが示唆された。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] K.Hosoya: "Conditionally immortalized brain capillary endothelial cell lines established from a Transgenic mouse harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"AAPS Pharmsci (http://www.Pharmsci.org/). 2. article27 (2000)
[文献書誌] K.Hosoya: "Conditionally immortalized retinal capillary endothelial cell lines (TR-iBRB) expressing differentiated endothelial cell functions derived from a transgenic rat"Exp.Eye Res.. 70. 163-172 (2001)
[文献書誌] K.Hosoya: "mRNA expression and transport characterization of conditionally immortalized rat brain capillary endothelial cell lines ; a new in vitro BBB model for drug targeting"J.Drug Targeting. (印刷中). (2001)
[文献書誌] T.Kitazawa: "Characterization of the amino acid transport of new immortalized choroid plexus epithelial cell lines : a novel in vitro system for investigating transport functions at the blood-cerebrospinal fluid barrier"Pharm.Res.. (印刷中). (2001)
[文献書誌] T.Tersaski: "Tissue Engineering for Therapeutic Use 4"Y.Ikada and Y, Shimizu, Elsevier Science B.V.. 192 (2000)
[文献書誌] V.H.L.Lee: "Retina, Third Edition"S.J.Ryan, Mosby. 2601 (2001)

2000 年度 実績報告書

温度感受性SV40T抗原遺伝子導入ラットを用いた血液網膜関門培養細胞実験系の開発

研究代表者

細谷 健一 富山医科薬科大学, 薬学部, 教授 (70301033)

研究成果

[文献書誌] K.Hosoya: "Conditionally immortalized brain capillary endothelial cell lines established from a Transgenic mouse harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"AAPS Pharmsci (http://www.Pharmsci.org/). 2. article27 (2000)

[文献書誌] K.Hosoya: "Conditionally immortalized retinal capillary endothelial cell lines (TR-iBRB) expressing differentiated endothelial cell functions derived from a transgenic rat"Exp.Eye Res.. 70. 163-172 (2001)

[文献書誌] K.Hosoya: "mRNA expression and transport characterization of conditionally immortalized rat brain capillary endothelial cell lines ; a new in vitro BBB model for drug targeting"J.Drug Targeting. (印刷中). (2001)

[文献書誌] T.Kitazawa: "Characterization of the amino acid transport of new immortalized choroid plexus epithelial cell lines : a novel in vitro system for investigating transport functions at the blood-cerebrospinal fluid barrier"Pharm.Res.. (印刷中). (2001)

[文献書誌] T.Tersaski: "Tissue Engineering for Therapeutic Use 4"Y.Ikada and Y, Shimizu, Elsevier Science B.V.. 192 (2000)

[文献書誌] V.H.L.Lee: "Retina, Third Edition"S.J.Ryan, Mosby. 2601 (2001)

2000 年度実績報告書

細谷健一富山医科薬科大学, 薬学部, 教授 (70301033)