三角両錐型パラジウム(II)錯体のL-システイン残基認識能のペプチド分析への応用

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12640583
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 會澤 宣一 富山大学, 工学部, 助教授 (60231099)
• 研究分担者: 蓮覚寺 聖一 富山大学, 工学部, 教授 (70019199) ; 中村 基 静岡大学, 工学部, 教授 (80022242) ; 山田 眞吉 静岡大学, 工学部, 教授 (60022737)
• キーワード: 三角両錐型パラジウム(II)錯体 / L-システイン残基 / チオレート硫黄 / 分子認識能 / グルタチオン

研究概要

前年度は、ホスフィン型三脚状四座配位子であるトリス(2-(ジフェニルホスフィノ)エチル)ホスフィン(PP_3)とアセトニトリルを配位子とした五配位三角両錐型パラジウム(II)錯体[Pd(PP_3)(CH_3CN)]^<2+>を用いると、アミノ酸官能基の中ではカルボキシル基やアミノ基よりもチオレート型硫黄原子を選択的に配位することが明らかになった。さらにこの錯体は立体的要因も重なり、L-メチオニン、L-ペニシルアミン、L-システインといった含硫アミノ酸の中から、L-システインのみを選択的に配位することもわかった。この結果に基づき、含硫アミノ酸混合溶液をpH9としてチオールを配位可能とし、L-システインだけをクロロホルム層にL-システナト錯体として抽出分離できた。さらに、生理活性ペプチドであるグルタチオンの定量は、pH9のグルタチオン水溶液と、[Pd(PP_3)(CH_3CN)](BF_4)_2のアセトニトリル溶液を混合し、分光光度定量することができた。配位リン原子の光酸化反応を阻害するために、遮光条件嫌気下で行うと、検出限界が改善されることがわかった。一方、酸化型のグルタチオンはチオレート硫黄原子がジスルフィド結合となっているため、チオラト錯体は形成しなかった。したがって、還元型と酸化型のグルタチオンが共存する系において、還元型グルタチオンのみを選択定量できることがわかり、生体内酸化還元系の抗酸化状態を検知するために応用できることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Yasumasa Kanekiyo: "Complexation Equilibria of Oxy-Acid-2-Amino-2-Deoxy-D-Gluconic Acid- Metal(II) Ion Ternary Systems in Aqueous Solution As Studied by Potentiometry. Binding Characteristic of Borate and Germanate"Inorganica Chimica Acta. 298・2. 154-164 (2000)
• [文献書誌] Motoshi Nakamura: "Fluorometric Determination of Ethofenprox in Waters by Using Solid-Phase Extraction"Fresenius'Journal of Analytical Chemistry. 367・7. 658-660 (2000)
• [文献書誌] Sen-ichi Aizawa: "Circular Dichroism Spectrophotometric Determination of Metal Ions Using Optically Active Tris(thiolato) Type Rhodium(III) Complexes"Bulletin of the Chemical Society of Japan. 73・9. 2043-2050 (2000)
• [文献書誌] Sen-ichi Aizawa: "Discrimination of Thiolate Group in L-Cysteinate and Glutathionate by Axial Coordination Site of Five-Coordinate Trigonal-Bipyramidal palladium(II) Complex with Tris(2-(diphenylphosphino)ethyl)phosphine"Chemistry Letters. ・12. 1412-1413 (2000)
• [文献書誌] Sen-ichi Aizawa: "Kinetic Effect of Zinc(II) and Cadmium(II) Ions on Configurational Inversion of 〓_<LLL>-fac(S)-Tris(L-cysteinato-N, S)cobalt(III) Complex"Analytical Sciences. 17・2. 339-343 (2001)
• [文献書誌] Motoshi Nakamura: "Relation of Sorption Behavior of Agricultural Chemicals in Solid-Phase Extraction with Their n-Octanol/Water Partition Coefficients Evaluated by High-Performance Liquid Chromatography(HPLC)"Analytica Chimica Acta. 428. 219-226 (2001)
• [文献書誌] Makoto Wakabayashi: "Pressure Studies on the Metallation of Porphyrin-Carring Copolymers"Macromolecular Chemistry and Physics. 202. 3136-3141 (2001)
• [文献書誌] Sen-ichi Aizawa: "Thiolato-Ligand Substitution Reaction with Halide Ions of Five-Coordinate Trigonal-Bipyramidal Palladium(II) Complexes with Tris(2-(diphenylphosphino)-ethyl)phosphine. Electronic and Steric Effects on the Reaction Mechanism"Bulletin of the Chemical Society of Japan. 75・1. 91-97 (2002)