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本研究課題は、発芽イネ種子におけるデンプンーショ糖転換調節機構の解明とデンプン代謝系の遺伝子操作による発芽力調節技術の確立を目指している。本年度は主に、(1)発芽イネ種子におけるα-amylaseおよびUDP-glucose pyrophosphorylase(UGPase)の組織、時期、ホルモン特異的発現調節、(2)α-アミラーゼ発現の転写調節におけるヒストンアセチル化の関与に関する研究を進めた。
(1)UGPaseの発現は、主に胚盤およびアリューロン層組織において見られたが、発芽過程における時期特異性は認められなかった。α-アミラーゼI-1は発芽初期においては胚盤組織、発芽後期から伸長生長期においてはアリューロン層で発現するが、α-アミラーゼII-4の発現は発芽初期においては胚盤組織および幼芽鞘で見られ、伸長生長期においてはα-アミラーゼI-1と同様にアリューロン層で起こることが分かった。また、発芽イネ種子のアリューロン層におけるα-アミラーゼII-4分子の発現はそのプロモーター領域にジベレリン(GA)応答シス因子がないのにも関わらずGAによって誘導され、さらに、GAによるα-アミラーゼII-4分子の誘導はCa^<2+>およびカルモデュリンを介した転写後調節によるものであることが明らかになった。(2)ヒストンデアセチラーゼの阻害剤であるトリコスタチンA(TSA)を用いた実験から、発芽イネ種子のアリューロン層におけるα-アミラーゼ遺伝子の転写にヒストンアセチル化が関与していることが示唆された。しかし、胚盤組織におけるα-アミラーゼ遺伝子の転写はTSAによって変化しなかった。これらの結果から、ヒストンアセチル化によるイネα-アミラーゼ遺伝子の転写調節は組織特異的に行われていると考えられた。
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