| 研究課題/領域番号 |
12660243
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| 研究機関 | 東京農業大学 |
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研究代表者 |
渡邊 乾二 東京農業大学, 農学部, 教授 (70023447)
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| 研究分担者 |
海老名 卓三郎 宮城県立がんセンター研究所, 免疫部, 部長
下山田 真 岐阜大学, 農学部, 助手 (60235695)
長岡 利 岐阜大学, 農学部, 助教授 (50202221)
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| キーワード | 卵白蛋白質 / オボムチン / 脂質代謝改善作用 / 抗腫瘍活性 |
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| 研究概要 |
卵白オボムチンは巨大分子の粘性のある糖蛋白質であり、α-とβ-サブユニットから構成されている。前年度のα-サブユニットの一次構造と抗腫瘍活性の解析に引き続き、β-サブユニットの一次構造と食品機能の解析を行った。
β-サブユニットより得られたフラグメントのアミノ酸配列から8本のミックスプライマーを作製し、プローブ作製に用いた。鶏輸卵管mRNAからcDNA合成を行い、PCRを行った。得られたPCR増幅断片をベクターに挿入し、大腸菌JM109を形質転換した。ポジティブクローンを選別し、塩基配列を決定した。本結果からオボムチンβ遺伝子は多様性に富んだ配列を有していると予想された。得られた配列につき相同性検索を行った結果、哺乳類ムチン遺伝子と高い相同性を示した。
オボムチン及びそのプロナーゼ加水分解物を用いて、カゼインと大豆蛋白質との比較のもとに、ラットに経口投与した場合の脂質代謝改善作用を検討した。オボムチンは他の蛋白質に比べて血清脂質代謝改善作用、特に血清コレステロール低下作用があること、さらに、プロナーゼで加水分解することによって、オボムチンのその作用が強くなることを明らかにした。さらに、β-サブユニット中の220kDaと120kDaフラグメントに、細胞培養系、マウス一重・二重移植腫瘍系における抗腫瘍活性を認めた。その機構として、腫瘍細胞に対してネクローシスを誘発する直接的傷害作用と免疫賦活作用を明らかにした。二重移植腫瘍系の試験において、血管新生阻害を主要な活性発現機構であると示した。
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