| 研究課題/領域番号 |
12660284
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| 研究機関 | 岐阜大学 |
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研究代表者 |
杉山 誠 岐阜大学, 農学部, 助教授 (80196774)
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| 研究分担者 |
山本 欣郎 岐阜大学, 農学部, 助手 (10252123)
源 宣之 岐阜大学, 農学部, 教授 (10144007)
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| キーワード | ロタウイルス / 発現精製VP8 / レセプター / 培養細胞 / 動物組織 |
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| 研究概要 |
ヒトロタウイルスWa株およびSA11株のVP8遺伝子をpGEX発現ベクターに組み込み、それぞれの組換え蛋白質の発現を確認した。さらに、それぞれを大量発現させ、精製を終了した。現在、残りのウシロタウイルスNCDV株およびトリロタウイルスTy-3株のVP8遺伝子のクローニングを行っている。
ハトから分離されたトリロタウイルスPO-13株の発現精製VP8蛋白質を用いて、サル由来培養細胞MA104細胞およびVero細胞そしてハムスター由来培養細胞CER細胞上に存在するレセプターを染色した。サル由来細胞では細胞表面上に多くレセプターを発現しているものとほとんど発現していないものがみられた。一方、ハムスター由来細胞では細胞間にのみに発現している像が認められた。これらの細胞でのPO-13株の感受性を調べるために、それぞれの細胞で同株のウイルスカ価を測定したところ、MA104細胞で10^<7.2>、Vero細胞で10^<4.9>そしてCER細胞で10^<2.1>ffu/mlとなった。明らかにレセプターの発現が少ないと考えられたCER細胞の本ウイルスの感受性は低い結果となった。
発現精製VP8を用いた培養細胞でのレセプターの染色法を動物組織に応用するため、ハトおよびマウスの腸管を用いて、染色法の検討を行っている。現在までのところ、非特異的な反応が強く見られ、成功には至っていない。
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