受容体作動性Ca^<2+>透過型陽イオンチャネルとTRP関連蛋白質の分子的相関の研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670088
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 井上 隆司 九州大学, 医学研究院, 助教授 (30232573)
• キーワード: TRP蛋白質 / G蛋白質共役型受容体 / 受容体活性化Caチャネル / イノシトールリン脂質 / 血管α1アドレナリン受容体 / 血圧調整 / TRP関連蛋白質 / ヘテロ会合体

研究概要

G蛋白質共役型受容体の刺激時に活性化されるCa^<2+>透過型陽イオンチャネル(receptor-operated cation channels ; ROCCs)が、がショウジョウバエ視覚異常に関連したTRP蛋白質(transient receptor potential protein)の脊椎動物ホモログと分子レベルで密接に対応している可能性に着目し、その分子的対応関係を明らかにすることを目的として、TRP蛋白質を組換え発現したHEK293細胞、native組織から急性単離した細胞を用いて、以下のことを明らかにした。血圧の調節に中心的な役割を果たしているa_1アドレナリン受容体(百日咳毒素非感受性、イノシトールリン脂質代謝と関連)活性化時に生じるCa^<2+>流入の分子実体として、TRPホモログの一つTRP6が必須の構成蛋白質であることを、TRP6遺伝子の組換発現・TRP6抗体による免疫組織学的手法・TRP6特異的アンチセンスオリゴヌクレオチド法によるnative血管組織の機能的ノックアウトによって明らかにした(Circ Res88,325-332,2001)。また、TRP6とTRP関連蛋白質のLTRPC2がヘテロ会合体を形成し、中枢神経、副腎クロム親和性細胞や消化管平滑筋のムスカリン受容体活性化陽イオンチャネル(百日咳毒素感受性)と極めて似た性質を示すチャネル活性を発現している実験証拠を得た(第54回日本薬理学会西南部会発表)。TRP関連蛋白質LTRPC7が網膜芽細胞腫の増殖サイクルの制御に重要なCa^<2+>経路として重要な役割を果たしている可能性を支持する証拠を得た(第75回日本薬理学会西南部会発表予定)。

研究成果

• [文献書誌] Inoue R, Okada T, Onoue H, Hara Y, Shimizu S, Naitoh S., Ito Y, Mori Y: "TRP6 is the essential component of vascular a_1-adrenoceptor activated Ca^<2+>-permeable cation channel"Circulation Research. 88. 325-332 (2001)
• [文献書誌] Doira, N, Hanano, K., Onoue, H., Nakano, H., Ito, Y., Inoue R: "Reconstitution in lipid bilayer of smooth muscle cation channels activated through a GTP-binding protein"Journal of Smooth Muscle Research. 37(2). 39-51 (2001)
• [文献書誌] Morita, H., Sharada, T., Takewaki, T., Ito, Y., Inoue, R: "Multiple regulation by external ATP of nifedipine-insensitive, high voltage-activated Ca^<2+> current guinea-pig mesenteric terminal arteriole"Journal of Physiology. (in press). (2002)
• [文献書誌] Mori, Y., Inoue, R., Ishii, M., Hara, Y., Imoto, K: "Dissecting receptor-mediated Ca^<2+> influx pathways : TRP channels and their native counterparts"Japanese Journal of Pharmacology. 87. 245-252 (2001)
• [文献書誌] 井上隆司, 伊東祐之, 森泰生: "標的蛋白質からみた創薬:急速に拡大するTRP蛋白質ファミリーと新しい創薬の可能性"日本臨床. 60巻1号. 18-24 (2002)
• [文献書誌] 森泰生, 井本敬二, 井上隆司: "カルシウムチャネルの構造と機能"Clinical Calcium. 11(11). 1-8 (2001)
• [文献書誌] Inoue R, Mori Y: "Novartis Foundation Symposium volume 246, ed. D. Eisner, (Molecular candidates for capacitative and non-capacitative Ca^<2+> entry in smooth muscle. In : Role of the Sarcoplasmic Reticulum in Smooth Muscle.)"Wiley and Sons Ltd., Chichester, UK. (in press). (2002)