| 研究課題/領域番号 |
12670111
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
医化学一般
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
古川 圭子 名古屋大学, 大学院・医学部研究科, 講師 (50260732)
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| 研究分担者 |
古川 鋼一 名古屋大学, 大学院・医学部研究科, 教授 (80211530)
伊藤 道一郎 長崎大学, 歯学部, 講師 (70223188)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| キーワード | ガングリオシド / ノックアウト / ターゲッティング / 神経変性 / 再生 / サブトラクション / ニューロン / グリア |
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| 研究概要 |
1.GM2/GD2合成酵素遺伝子をノックアウトして、複合型ガングリオシドを欠失するマウスに関して、(1)その加齢に伴う神経変性の病理学的な特徴、(2)変性の分子メカニズム、につき検討した。
まず、末梢神経変性に関しては、50週齢のマウスにおいて著明な坐骨神経の変性、脊髄後根神経節細胞のアポトーシス、脊髄後角のニューロン死、更にグリアの肥大化を認めた。また電顕おいては、アストロサイトの突起の肥大化、伸長と、血管周囲への肥大化突起の包囲像を認めた。また、シナプスベジクルの形態変化とシナプス形態の変化(スパイン型からデンドライト型へ)を認めた。これらの変化は雄では35週齢以降、雌では45週齢以降に明らかになり、同時に歩行の異常など神経異常所見が見られた。よって約25週齢の野生型、KOマウスの脊髄よりRNAを抽出し、神経症状の出現する前に発現レベルの変化する遺伝子の検索を行った。cDNAを調整し、サブトラクションとdifferential hybridizationを行うことにより、KOマウスで著明に発現低下する遺伝子約37クローン得た。その中にはミトコンドリア膜酵素群、プロテアーゼ群などが含まれ、詳しい意義につき解析中である。
2.GD3合成酵素遺伝子をノックアウトしてb系列ガングリオシドを欠失するマウスに関して、(1)その神経変性の過程、(2)神経再生能の変化の解析、を行った。
このKOマウスでは、末梢神経の変性像は比較的軽度であったが、舌下神経の切断による再生能の検討において明らかな低下を認め、b系列ガングリオシドが神経再生にとって必須であることが示された。現在その作用機構を解析中である。
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