ヒト腫瘍での一酸化窒素合成酵素産生とp53変異,TGFβシグナル伝達異常との関連

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670164
• 研究機関: 高知医科大学
• 研究代表者: 降幡 睦夫 高知医科大学, 医学部, 助手 (10209158)
• キーワード: p57 / p27 / サイクリンD1 / サイクリンE / hMLH1 / メチル化

研究概要

外科的に切除されたヒト食道扁平上皮癌にて、p57抗体を用いた免疫組織化学的検索を行い、癌細胞周期での各々の発現状況を患者の予後及び臨床病理学的因子との関連において統計学的に比較検討し、p57発現の予後因子としての役割は他の細胞周期制御因子に比較して軽度であることを示した。さらにp53蛋白発現及び遺伝子に関してそのエクソン5-8に関してPCRにて増幅後ダイレクトシークエンスにて遺伝子解析を施行し、アミノ酸置換を伴う点突然変異パターンと喫煙歴との関連を有意差をもって示した。p27に関してはサイクリンD1及びサイクリンEとの食道癌における発現を検討してきたが、今回はこれら蛋白の発現における相互関連を細胞レベルで検討し、p27がサイクリンD1発現とは独立しており、サイクリンE発現と相関してその発現量が増加する事を示した。サイクリンD1及びサイクリンEの腫瘍での過剰発現に関しては、ヒト肺癌(腺癌及び扁平上皮癌)においても検討を加え、組織型との関連を示した。
尿路移行上皮癌に関しては、今まで継続してきた腫瘍におけるミスマッチ修復遺伝子hMSH2,hMSH6異常に加え、今回はhHLH1遺伝子の異常を、その遺伝子解析とさらにはhMLH1遺伝子プロモーター領域のメチル化についても制限酵素処理後のPCR去にて検討し、移行上皮癌におけるミスマッチ修復遺伝子異常に基づく癌関連遺伝子の遺伝子異常につき総括を試みた。結果は、移行上皮癌に関してはこの遺伝子異常及びプロモーター領域のメチル化の頻度は低いが(1.7%)、これら腫瘍ではhMLH1抗体を用いた免疫組織化学的検索で陰性を示し、hMLH1プロモーター領域のメチル化によりその蛋白発現が抑制されており、腫瘍動態に影響を与えている可能性が示された。

研究成果

• [文献書誌] Matumoto M,Furihata.M. et al: "Immunohistochemical charactrization of p57KIP2 expression in human esophageal squamous cell carcinoma"Anticancer Research. 20. 1947-1952 (2000)
• [文献書誌] Mizobuchi S,Furihata M, et al: "Association between p53 immunostaining and cigarette smoking in squamous cell carcinoma of the esophagus."Japanese Journal of Clinical Oncology. 30. 423-428 (2000)
• [文献書誌] Anayama T,Furihata M, et al: "Insufficient effect of p27 KIP1 to inhibit cyclinD1 in human esophageal cancer in vitro"International Journal of Oncology. 18. 151-155 (2001)
• [文献書誌] Yamanouchi H,Furihata M, et al: "Expression of cyclinE and cyclinD1 in non-small cell lung cancers"Lung Cancer. 31. 3-8 (2001)
• [文献書誌] Takeuchi T,Furihata M et al: "Expression of SMARCF-1 a truncated form of SW1, in neuroblastoma."American Journal of Pathology. 158. 663-672 (2001)
• [文献書誌] Furihata M, et al.: "Genetic analysis of hMLH1 in transitional cell carcinoma of the urinary tract : promoter methylation or mutation"Journal of Urology. (in press).