ヒト腫瘍における癌抑制遺伝子Lats1変異の解析

2002 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 12670184
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 産業医科大学
• 研究代表者: 橋本 洋 産業医科大学, 医学部, 教授 (10128069)
• 研究分担者: 久岡 正典 産業医科大学, 医学部, 助教授 (40218706)
• 研究期間 (年度): 2000 – 2002
• キーワード: 軟部腫瘍 / 癌抑制遺伝子 / Lats1 / 遺伝子解析 / 分子遺伝学 / 遺伝子プロモーター / メチル化CpG

研究概要

ショウジョウバエの癌抑制遺伝子として最近見い出されたWarts/LATS1遺伝子の欠損マウスでは高率に軟部肉腫や卵巣腫瘍を発生することが報告されているが、ヒト腫瘍におけるこの遺伝子ホモログ(h-Warts/LATS)の変異を調査した研究は乏しい。本研究ではヒト軟部肉腫を対象とし、種々の分子生物学的手法を用いてこの遺伝子変異の有無を検索した。初年度にはそれまで未確定であったh-Warts/LATS1遺伝子の構造をより明らかにするとともに、reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)法によって50例のヒト軟部肉腫を検索し、7例において遺伝子発現の低下ないし消失を認めた。次年度には、この7例についてh-Warts/LATS1遺伝子が局在する6q24-25.1のマイクロサテライトマーカーを用いて遺伝子欠失の有無を検討し、遺伝子発現が低下していた1例において欠失を見い出した。次にPCR-single strand conformation polymorphism(SSCP)によってこの遺伝子の翻訳領域における点突然変異の有無を検索し、7例中2例においてミスセンス変異を見い出した。さらに最終年度にはこの遺伝子の5'プロモーター領域におけるCpG配列のメチル化の有無をメチル化配列特異的なPCR法によって検索し、遺伝子発現の消失していた6例においてCpG配列のメチル化を認めた。以上の結果から、遺伝子欠失や点突然変異を含む種々のh-Warts/LATS1遺伝子変異がヒト軟部肉腫の一部の例で認められ、特に5'プロモター領域におけるCpG配列のメチル化に基づく遺伝子発現の消失が、それらの変異の中では高頻度に認められることが示された。したがってh-Warts/LATS1遺伝子がヒトにおける癌抑制遺伝子の一つであることを本研究で示すことができた。本研究結果も含めh-Warts/LATS1遺伝子に関して得られる情報が、今後ヒト腫瘍、特に軟部肉腫の診断や遺伝子治療等に臨床応用されることが期待される。

研究成果

• [文献書誌] Masanori Hisaoka: "Specific but variable expression of h-caldesmon in leiomyosarcomas : An immunohistochemical reassessment of a novel myogenic marker"Applied Immunohistochemistry and Molecular Morphology. 9・4. 302-308 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sumika Okamoto: "Extraskeletal myxoid chondrosarcoma : A clinicopathologic, immunohistochemical, and molecular analysis of 18 cases"Human Pathology. 32・10. 1116-1124 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sumika Okamoto: "Juxta-articular myxoma and intramuscular myxoma are two distinct entities. Activating Gsα mutation at Arg 201 codon does not occur in juxta-articular myxoma"Virchows Archiv. 440・1. 12-15 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Masanori Hisaoka: "Gene expression of TrkC (NTRK3) in human soft tissue tumours"Journal of Pathology. 197・8. 661-667 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sumika Okamoto: "Extraskeletal myxoid chondrosarcoma arising in the finger"Skeletal Radiology. 31・5. 296-300 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Masanori Hisaoka: "Molecular alterations of h-warts/LATS1 tumor suppressor in human soft tissue sarcoma"Laboratory Investigation. 82・10. 1427-1435 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Masanori Hisaoka: "HMGIC alternations in smooth muscle tumors of soft tissues and at other sites"Cancer Genetics and Cytogenetics. 138 1. 50 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Xiao-Qiu Li: "Intranasal pericytic tumors (glomus tumor and sinonasal hemangiopericytoma -like tumor) : report of two cases with review of the literature"Pathology International. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Masanori Hisaoka: "Inflammatory myofibroblastic tumor with predominant anaplasic lymphoma kinase (ALK)-positive spindle cells lacking a myofibroblastic phenotype"Pathology International. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Masanori Hisaoka: "Micortubule-associated protein-2 and class III β-tubulin are expressed in extraskeletal myxoid cliondrosarcoma"Modem Pathology. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Hisaoka M, Sheng W-Q, Wang J, Morio T, Hashimoto H.: "Specific but variable expression of h-caldesmon in leiomyosarcomas: An immunohistochemical reassessment of a novel myogenic marker"Appl Immunohistochem. 9(4). 302-308 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Okamoto S, Hisaoka M, Ishida T, Imamura T, Kanda H, Shimajiri S, Hashimoto H.: "Extraskeletal myxoid chondrosarcoma: A clinicopathologic, immunohistochemical, and molecular analysis of 18 cases"Hum Pathol. 32(10). 1116-1124 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Okamoto S, Hisaoka M, Meis-Kindblom J M, Kindblom L-G, Hashimoto H.: "Juxta-articular myxoma and intramuscular myxoma are two distinct entities. Activating Gsα mutation at Arg 201 codon does not occur in juxta-articular myxoma"Virchows Arch. 440(1). 12-15 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hisaoka M, Sheng W-Q, Tanaka A, Hashimoto H.: "Gene expression of TrkC (NTRK3) in human soft tissue tumors"J Pathol. 197(8). 661-667 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Okamoto S, Hara K, Sumita S, Sato K, Hisaoka M, Aoki T, Hashimoto H.: "Extraskeletal myxoid chodrosarcoma arising in the finger"Skeletal Radiol. 31(5). 296-300 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hisaoka M, Tanaka A, Hashimoto H.: "Molecular alterations of h-warts/LATS1 tumor suppressor in human soft tissue sarcoma"Lab Invest. 82(10). 1427-1435 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hisaoka M, Sheng W-Q, Tanaka A, Hashimoto H.: "HMG1C alterations in smooth muscle tumors of soft tissues and at other sites"Cancer Genet Cytogenet. 138(1). 50-55 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Li X-Q, Hisaoka M, Morio T, Hashimoto H.: "Intranasal pericytic tumors (glomus tumor and sinonasal hemangiopericytoma-like tumor): report of two cases with review of the literature"Pathol Int. 53 (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hisaoka M, Shimajiri S, Matsuki Y, Meis-Kindblom JM, Kindblom L-G, Li X-Q, Wang J, Hashimoto H.: "Inflammatory myofibroblastic tumor with predominant anaplasic lymphoma kinase (ALK)-positive spindle cells lacking a myofibroblastic phenotype"Pathol Int. 53 (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hisaoka M, Okamoto S, Koyama S, Ishida T, Imamura T, Kanda H, Kameya T, Meis-Kindblom JM, Kindblom L-G, Hashimoto H.: "Microtubule-associated protein-2 and class III β-tubulin are expressed in extraskeletal myxoid chodrosarcoma"Med Pathol. 16 (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より