マスト細胞の蛋白質分解酵素をコードする遺伝子群の発現制御機構

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670202
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 實寶 智子 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70252658)
• キーワード: 細胞分化 / マスト細胞 / 遺伝子発現 / 転写因子 / マスト細胞プロテアーゼ / MITF / 突然変異 / mi / miマウス

研究概要

マスト細胞プロテアーゼ遺伝子の発現機構について調べた結果、転写因子MITFをコードしているmi遺伝子座に2個の突然変異をもつmi/miマウスのマスト細胞では、mouse mast cell protease:MMCP-4,5,6に加えて、MMCP-2,9の発現も低下していることをみつけた。mi/miマウスの培養マスト細胞にレトロウィルスの系を用いて、野生型のMITFもしくはミュータント型のMITFを導入して、MMCP-2,MMCP-9遺伝子の発現を調べた結果、正常+/+マウスの培養マスト細胞と同程度にこれらの遺伝子の発現が回復した。このことはMITFがMMCP-2,9の発現に関与していることを示している。さらに、MMCP-2,MMCP-9遺伝子の5'上流域をクローニングして、各遺伝子の5'上領域に各々の遺伝子の転写を活性化するプロモーター領域があるかどうかをluciferase assayを用いて調べた。その結果、MMCP-2,MMCP-9遺伝子の5'上流域のCANNTG配列がこれらの遺伝子の転写の活性化に関与することを見いだした。gel shift assayで調べた結果、各々の遺伝子の転写に関与すると思われるCANNTG配列にMITFが結合することがわかった。以上の結果から、MMCP-2,MMCP-9遺伝子はMITFが直接結合することによって、転写が活性化されていることが明らかとなった。現在はMMCP-2,MMCP-9遺伝子が存在するのと同じ染色体上にあるcathepsin Gの発現に関するMITFの関与についても検討している。

研究成果

• [文献書誌] Adachi S et al: "Involvement of mi-transcription factor(MITF)mi expression of α-melanocyte stimulating hormone receptor in cultured mast cells of mice"J Immunology. 164. 855-860 (2000)
• [文献書誌] Kitamura Y et al: "The mi-transcription factor(MITF)as a regulator of mast cell differentiation"Int J Hematol. 71. 197-202 (2000)
• [文献書誌] Ge Y et al: "Independent influence of strain difference and mi transeription factor(MITF)on the expression at mouse mast cell chymases"Am J Pathol. 158. 281-292 (2001)
• [文献書誌] Kitamura Y et al: "Mutant mice : a useful tool for studying development of mast cells"Int Arch Allergy Immunol. (in press).
• [文献書誌] Morii E et al: "Importance of leucine zipper domain of mi-transcription factor(MITF) for differentiation of mast cells demonstrated using mi(ce)/mi(ce) mutant mice of which MITF lacks the zipper domain"Blood. (in press).
• [文献書誌] Jippo T et al: "Tissue-dependent alteration of protease expression phenotype in murine peritoneal mast cells that were genetically labeled with green fluorescent protein"Am J Pathol. (in press).