研究概要 |
骨芽細胞は、1)骨髄造血系細胞の増殖に必要なM-CSFなど液性因子の供給、2)破骨細胞への最終分化に不可欠な破骨細胞分化因子(RANKL)の発現を介して破骨細胞形成を支持する。私どもはマウスRANKL遺伝子5'上流プロモータ領域を解析し、機能的に有効なVDRE(-937/-922)の解析に加えて、グルココルチコイドの作用に着目して、マウスRANKL遺伝子プロモータ領域のputativeなグルココルチコイド応答配列(-642/-628)について、mutationを導入したconstructを作成して転写活性を検討した。さらに、プロモータ領域に存在するCpG islandのメチル化が遺伝子発現制御に関与することを示した。マウス培養ストローマ細胞ST2は継代数に依存して破骨細胞形成支持能とRANKL発現が低下する。この際、RANKL遺伝子高発現のPassage9(P9)に比してRANKL発現が低いP16では、外因性に導入したRANKL promoter constructの転写活性にはP6と差異を示さないが、遺伝子転写開始部位周辺のCpGが高率にメチル化修飾を受けていることを示した。 悪性腫瘍骨転移巣におけるRANKL発現を検索するために、マウスおよびヒトRANKL遺伝子に対する高感度・特異的なプローブを作成してin situ hybridization法を行い、局所のRANKL mRNAを検出した。 以上の成果は、英文誌に投稿した(BBRC, Histochem Cell Biol, J Pathol)。また、成果の一部は第90回日本病理学会総会、第19回日本骨代謝学会、第23回米国骨代謝学会議にて報告した。
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