HTLVおよびHHV産生細胞の各種抗原発現に関する免疫電子顕微鏡的研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670205
• 研究機関: 高知医科大学
• 研究代表者: 大朏 祐治 高知医科大学, 医学部, 教授 (30136387)
• キーワード: 成人T細胞白血病ウイルス / ヒトヘルペスウイルス / 微細構造 / 免疫電顕 / T細胞抗原 / ウイルス抗原

研究概要

平成12年度においては、HTLV-Iと-IIウイルス産生株細胞におけるT細胞受容体発現状況について免疫電顕法により検討した。その結果、T細胞受容体は、それらの亜分画も含め発現異常状況であることを明らかにした。また、ヒトヘルペスウイルス(HHV)の8型に関しては、HHV-8型粒子産生がわずかに認められるのみのprimary effusion lymphoma(PEL)由来細胞株のTPA処理により、核内粒子、胞体外成熟粒子が容易に電顕観察され、それらの微細構造につき報告し、他のHHVとの比較検討を行った。
平成13年度は、HHV-6型の検討を重点的に行った。HHV-6は粒子としての観察が容易ではなく、細胞株においてもウイルスゲノムを有していても粒子産生が認められないことが多い。今回は、成人T細胞白血病患者由来T細胞株(MT-4)にHHV-6型を感染させるとHHV-6型ウイルス特異蛋白発現が認められるという事実に基づき、HHV-6型の電顕観察を試みた。その結果、感染状況はlyticであるもののHHV-6産生は顕著に認められた。核内、核膜腔内、胞体内、胞体外粒子が観察された。核内粒子は核膜周囲腔に芽出した後に胞体外成熟粒子となるか、核膜孔を通過して胞体に移行し、胞体外粒子として成熟するかの2通りの可能性を見出した。成熟型粒子でも、これら2通りの成熟方法が示唆される形態的相違が認められた。核膜孔を通過したものはテグメント部の中間層が不明瞭であり、一方、核内膜被覆により芽出するものは明瞭に認められた。他のHHV粒子(4、5、7、8型)との比較検討を行った。また、MT-4細胞株はHTLV-I産生株でもあり、C型であるHTLV-I粒子もしばしば同時に観察された。HHV-6の微細構造検索に関する投稿論文は目下準備中である。

研究成果

• [文献書誌] 大朏 祐治: "リンパ球系培養細胞の免疫電顕"臨床電顕誌. 33(2). 137-145 (2001)
• [文献書誌] T Takeuchi et al.: "Expression of SMARCF1, a truncated form of SWI1, in neuroblastoma"Am J Pathol. 158. 663-672 (2001)
• [文献書誌] T Nagai et al.: "Elevation of cytokeratin 19 fragment in serum in patients with hepatoma : its clinical significance"Eur J Gastroenterol Hepatol. 13. 157-161 (2001)
• [文献書誌] N Hatakeyama et al.: "Lactate dehydrogenase production and release in a newly established human myeloma cell line"Am J Hematol. 66. 267-273 (2001)
• [文献書誌] A Kurabayashi et al.: "Expression of bax and apoptosis-related proteins in human esophageal squamous cell carcinoma including dysplasia"Mod Pathol. 14(8). 741-747 (2001)
• [文献書誌] H Hayashi et al.: "Immunohistochemical findings of nitric oxide synthase expression in urothelial transitional cell carcinoma including dysplasia"Oncol Rep. 8. 1275-1279 (2001)
• [文献書誌] M Furihata et al.: "Genetic analysis of hMLH1 in transitional cell carcinoma of the urinary tract : promoter methylation or mutation"J Urol. 165. 1760-1764 (2001)
• [文献書誌] SB Liang et al.: "Reduced human mismatch repair protein expression in the development of precancerous skin lesions to squamous cell carcinoma"Virchows Arch. 439. 622-627 (2001)
• [文献書誌] M Furihata et al.: "Frequent phosphorylation at serine 392 in overexpressed p53 protein due to missense mutation in carcinoma ofthe urinary tract"J Pathol. (in press).
• [文献書誌] M Furihata et al.: "P53 mutation arising in Arg72 allele in the tumorigenesis and development of carcinoma of the urinary tract"Clin Cancer Res. (in press).