| 研究課題/領域番号 |
12670244
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
寄生虫学(含医用動物学)
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| 研究機関 | 久留米大学 |
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研究代表者 |
福間 利英 久留米大学, 医学部, 教授 (90125146)
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| 研究分担者 |
原 樹 久留米大学, 医学部, 助手 (30238159)
平田 瑞城 久留米大学, 医学部, 助教授 (70080629)
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| 研究期間 (年度) |
2000 – 2001
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| キーワード | マラリア / ワクチン / MSP-1 / Trypanosoma brucei / VSG |
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| 研究概要 |
本課題では、アフリカトリパノソーマ原虫(Trypanosoma brucei)を利用したマラリアワクチン開発の基礎研究を行った。研究成果の概要は以下の通りである。
1:MSP-1遺伝子(msp-1)を組み込んだT.brucei用発現ベクターを作製した。これらのベクターを導入し、T.bruceiプロサイクリック型原虫での発現を試みたが、MSP-1の発現は確認できなかった。発現ベクターに組み込んでいる薬剤耐性遺伝子は正常に発現・機能していることと他の遺伝子を組み込んだ場合には問題なく発現されることから、タンパク質のフォールディングなどmsp-1自体に何らかの原因があると推察している。
そこで、T.brucei血流型原虫の変異型細胞表面糖タンパク質(VSG)のアジュバント効果を利用したマラリアワクチン開発へと研究の方向を転換した。
2:ヒスチジンタグ・VSGN-末端保存領域・MSP-1・VSGC末端保存領域の融合タンパク質(VSG-MSP)とヒスチジンタグ・MSP-1の融合タンパク質をバキュロウイルス・昆虫細胞系を用いて発現させた。組換え融合タンパク質はグアニジンを用いて可溶化し、Ni-アガロースアフィニティカラムで精製した。
3:マウスは組換えタンパク質を腹腔内投与することで免疫し、最初の免疫から3週後と6週後に追加免疫をした。最終免疫から3週間後、10^6のマラリア感染赤血球をマウスへ腹腔内接種し、チャレンジを行った。その結果、治癒効果は認められなかったもののVSG-MSPでは、虫血症の遅延効果が認められた。
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