ヒト免疫不全ウイルスの組込み前複合体の構造と機能に関する研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670289
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 北村 義浩 国立感染症研究所, 免疫部, 室長 (10202037)
• キーワード: ヒト免疫不全ウイルス / 組み込み酵素 / 単クローン抗体

研究概要

1型ヒト免疫不全ウイルスはヒトCD4陽性T細胞に感染し、逆転写によって2本鎖DNAを合成する。このDNAはHIV-1の組み込み酵素(IN)を含む様々な蛋白質とともに大きな核酸-蛋白質複合体(組み込み前複合体、preintegration complex;PIC)を形成する。
今年度は、我々が作製したマウス単クローン抗体2-19(mAb2-19)を用いてPICを免疫沈降してPICを精製することを試みた。低濃度(10ug/mL以下)のmAb2-19ではPICを沈降させることが出来なかった。より高濃度のmAb2-19を用いてはじめて沈降できた。しかし、この条件では、PICの構造解析が出来るために必要な量を沈降させるためには大量にmAb2-19が必要である事が分かった。これは感染細胞を溶解する際に使用した界面活性剤(NP-40)がmAb2-19の結合を弱めているためと推測した。今後は、より効率がよい沈降条件を模索する。

研究成果

• [文献書誌] Xiaomi Xin,Koichiro Nakamura,Huanliang Liu,Emi,E.Nakayama,Mieko Goto,Yoshiyuki Nagai,Yoshihiro Kitamura,Tatsuo Shioda,and Aikichi Iwamoto: "Novel polymorphisms in Human Macrophage Inflammatory Protein-1 alpha (MIP-1a) Gene"Genes and Immunity. 2(in press). (2001)
• [文献書誌] Noriko Kobayashi,and Yoshihiro Kitamura: "Retroviral integrase but not sequence of donor long terminal repeats determines target site preference for viral integration in vitro"Jpn.J.Inf.Dis.. 53(in press). (2001)
• [文献書誌] Toshihiko Ogata,Nobuo Okui,Ryuta Sakuma,Noriko Kobayashi,and Yoshihiro Kitamura: "Integrase of human endogenous retrovirus K-10 supports replication of replication-incompetent Int-human immunodeficiency virus type 1 mutant"Jpn.J.Inf.Dis.. 52. 251-252 (2000)
• [文献書誌] Nobuo Okui,Noriko Kobayashi,Ryuta Sakuma,Hiroshi Yoshikura,Tadaichi Kitamura,Joe Chiba,and Yoshihiro Kitamura: "Packageable antiviral therapeutics against human immunodeficiency virus type 1 : virion-targeted virus inactivation by incorporation of a single-chain antibody against viral"Hum.Gene Ther.. 11. 537-546 (2000)