全身性エリテマトーデスにおけるTCRξ鎖mRNAの3'UTR遺伝子異常の解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670436
• 研究機関: 埼玉医科大学
• 研究代表者: 津坂 憲政 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (00245490)
• 研究分担者: 竹内 勤 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (50179610)
• キーワード: 全身性エリテマトーデス / TCRζ鎖 / mRNA3'UTR / alternative splicing / In vitro translation / dimerization

研究概要

我々はこれまで、全身性エリテマトーデス(SLE)患者末梢血T細胞ではTCRζ鎖(ζ)タンパクの発現が低下すること、そしてalternative splicingで生じ562bp短い3'UTRをもつζmRNA(ζmRNA/as-3'UTR)が優位に発現されることを報告してきた。そこで今回、wild form 3'UTRをもつζmRNA(ζmRNA/w-3'UTR)とζmRNA/as-3'UTRからのζタンパク発現をin vitroで比較し、ζmRNAにおける3'UTR異常がζタンパク発現に及ぼす影響を検討した。as-3'UTRとw-3'UTRをそれぞれ含んだ全長ζmRNAをpSP64Poly(A)vectorに組み込み、in vitro transcriptionでmRNA発現を誘導した。精製したmRNAを[^<35>S]Metとともにwheat germ extractに加え、in vitro translationで誘導0分から120分後のζタンパク発現をSDS-PAGEおよびautoradiographyで比較した。ζmRNA/as-3'UTRからのζmonomer(16-kD)発現はζmRNA/w-3'UTRと比較して有意に低下した。さらにζmRNA/w-3'UTRから発現されるζhomodimer(32-kD)は、ζmRNA/as-3'UTRからは誘導されなかった。以上のことから、ζmRNAでは、3'UTRの異常がζmonomer発現だけでなくζhomodimer発現も低下させる可能性が示唆された。ζhomodime形成がTCR-CD3複合体形成に不可欠な過程であることから、SLE患者T細胞でのζmRNA 3'UTR発現異常が病態と関連する可能性があると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Ashmed S, Ihara K, Kanematsu S, Nakashima H, Otsuka T, Tsuzaka K, et al.: "Association of CTLA-4 but not CD28 gene polymorphisms with systemic lupus erythematosus in the Japanese population"Rheumatology. 40. 662-667 (2001)
• [文献書誌] 橋本博史, 吉木敬, 鈴木和男, 他: "厚生労働省厚生科学特定疾患・難治性血管炎に関する調査研究報告"日本臨床免疫学会会誌. 24. 336-346 (2001)
• [文献書誌] Ohishi T, Saito H, Tsuzaka K, et al.: "Anti-fibrogenic effect of an angiotensm converting enzyme inhibitor on chronic carbon tetrachioride-induced hepatic fibrosis in rats"Hepatol Res.. 21. 147-158 (2001)
• [文献書誌] 津坂憲政, 竹内勤: "T細胞レセプターζ鎖と全身性エリテマトーデスの治療"Molecular Medicine. 38. 386-392 (2001)
• [文献書誌] 津坂憲政: "mRNAの3'UTR領域"炎症と免疫. 9. 495-497 (2001)
• [文献書誌] 津坂憲政: "全身性エリテマトーデス患者T細胞におけるTCRζ鎖発現低下の分子生物学的機序"Neuroimmunology. 9. 197-203 (2001)
• [文献書誌] 津坂憲政: "血管炎"朝倉書店(東京). 2 (2001)