肝再生に伴う細胞外マトリックス再構築に関する研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670486
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 小出 典男 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (20142333)
• 研究分担者: 真治 紀之 岡山大学, 医学部・付属病院, 助手 (70314680) ; 草地 省蔵 岡山大学, 医学部, 教授 (30214943)
• キーワード: マトリックス再構築 / TGF-β / CTGF / 肝再生 / コラーゲン / 部分肝切除 / D-ガラクトサミン肝障害

研究概要

TGF-βは肝再生では2峰性の発現が知られており、後期の発現は増殖停止シグナルのみならず、増殖後の組織再構築に必要な細胞外マトリックス再構築にも働いているとされる。再生早期の一過性のTGF-βの作用の意義は明らかでない。肝再生での細胞外マトリックス再構築の重要性が指摘されている。Immediately-early geneの一つCCN family (CTGF、cyr61、nov)の遺伝子産物が、組織修復の早期で、細胞外マトリックス再構築を担っていることが指摘されている。CTGFはTGF-βによって発現が誘導され、線維化の維持に重要と指摘されている。
我々は、部分肝切除やD-ガラクトサミン肝障害後の肝再生時にCTGFの遺伝子発現がどのように変化するかをまず試みた。CTGF、TGF-β1、I型コラーゲンのmRNAの発現をRNase protection assayで定量した。
部分肝切除時には、TGF-β1、I型コラーゲンは2-6時間後と12-48時間後に発現が増強された。CTGFは6時間後に増強したが、その後コントロールレベルまで低下した。In situ hybridizationと肝星細胞の培養実験から、肝臓の類洞にそってCTGFを発現する細胞は星細胞であろうと推測された。D-ガラクトサミンの肝障害後にはCTGFは2-96時間で増強し、そのうち6-12時問で小さなピークと24時間でのメインピークを認めた。TGF-β1、I型コラーゲンは、今度はCTGFと同様の増強パターンを認めた。
部分肝切除では線維化を伴わない再生であるので後期のCTGF発現がなく、D-ガラクトサミンの肝障害後では壊死や炎症のためTGF-β1発現が高く、CTGFの発現が遷延し、一過性の線維化を伴う再生となるのではないかと考えられた。これらのサイトカインを人為的に調節したとき再生がどう修飾されるかを今後調べてみたい。

研究成果

• [文献書誌] S.Hirasaki 他: "Expression of the human Nov, Cyr61 and CTGF (CCN family) in human hepatocellular carcinoma"Hepatology Research. 19(3). 294-305 (2001)
• [文献書誌] M.Yokoyama 他: "Matrix matalloproteinase-2 (MMP-2) in pancreatic juice for diagnosis of pancreatic cancer. Pancreas"Pancreas. 23(掲載予定). (2002)
• [文献書誌] M.Nakamura 他: "Cytoskeletal Inhibitors, Anti-adhesion Molecule Antibodies, and Lectins Inhibit Hepatocyte Spheroid Formation"Acta Med Okayama. 56(掲載予定). (2002)
• [文献書誌] Y.Ayada 他: "Increased expression of biglycan mRNA in pressure-overloaded rat heart"Clin Exp Hypertens. 23(8). 633-643 (2001)
• [文献書誌] I.Sano 他: "OPC-8212, a quinoline derivative, counteracts the reduction in type III collagen mRNA due to lipopolysaccharides in cultured rat cardiac fibroblasts"Jpn Heart J. 42(1). 125-134 (2001)
• [文献書誌] 真治紀之 他: "Annual Review 消化器 2001"中外医学社. 6 (2001)