肺胞マクロファージにおける核内ホルモン受容体の発現と機能に関する分子生物学的研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670555
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 中村 浩淑 浜松医科大学, 医学部, 教授 (60164331)
• 研究分担者: 須田 隆文 浜松医科大学, 医学部・附属病院, 助手 (30291397) ; 佐々木 茂和 浜松医科大学, 医学部, 助手 (20303547)
• キーワード: 肺胞マクロファージ / 核内ホルモン受容体 / 1αhydroxylase / サルコイドーシス / PPARγ

研究概要

肺胞マクロファージにおける核内ホルモン受容体の発現と機能に関して研究をおこない、以下の結果を得た。
1.ヒト肺胞マクロファージにおける1αhydroxylaseの発現
サルコイドーシスとその他の呼吸器疾患患者の気管支洗浄液(BAL)を用い、1αhydroxylase-mRNA量をRT-PCRで定量的に測定したところ、サルコイドーシス患者では対照群に比べ、有意に増加していた。1αhydroxylase-mRNA量を、血中Ca、P、25(OH)D_3、1,25(OH)_2D_3濃度などのカルシウム代謝をあらわす指標、およびBAL中の細胞分画、リンパ球数、血中ACEなどサルコイドーシスの活動性をあらわす指標と対比検討した。サルコイドーシス患者群において、1αhydroxylase-mRNA量と血中25(OH)D_3/1,25(OH)_2D_3濃度比に有意の正相関がみられ、1αhydroxylaseが酵素として機能していることが示された。またサルコイドーシスの活動性が高い患者ほど1αhydroxylaseの発現が高まっていることが明らかとなった。現在、サルコイドーシス以外に1αhydroxylaseの発現が高くなっている呼吸器疾患を見出したので、検討を行っている。
II.ヒト肺胞マクロファージにおける核内ホルモン受容体の発現
BALから得たヒト肺胞マクロファージにどのような核内ホルモン受容体が発現しているかをRT-PCR法で検討した。甲状腺ホルモン受容体、レチノイン酸受容体、ビタミンD3受容体、peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)γの発現が確認されたが、とくにPPARγが高いレベルで発現していた。肺胞マクロファージにおけるPPARγの機能を調べるため、スカベンジャー受容体(CD36)、好炎症性サイトカイン(IL-6、TNFα)産生能、MHC class II、CD40、80、86などの表面抗原の発現を調べ、その機能を検討している。

研究成果

• [文献書誌] Inui N,Nakamura H, et al.: "A Significant Correlation between the 25-Hydroxyvitamin D3 la-Hydroxylase Gene Expression in Alveolar Macrophages and Activity of Sarcoidosis"Am J Med. (in press).
• [文献書誌] Zhao D-M,Nakamura H, et al.: "Effect of erythromycin on ATP-induced intracellular calcium response in A549 cells"Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 278. 726-736 (2000)
• [文献書誌] Xue H-H,Nakamura H, et al.: "Store depletion by caffeine/ryanodine activates capacitative ca2+ entry in nonexcitable A549 cells"J Biochem. 128(2). 329-336 (2000)
• [文献書誌] Matsushita A,Nakamura H, et al.: "Very strong correlation between dominant negative activities of mutant thyroid hormone receptors and their binding avidity for corepressor SMRT"J Endocrinol. 167(3). 493-503 (2000)
• [文献書誌] Nishiyama K,Nakamura H, et al.: "Different properties of the extreme carboxyl-terminal region (AF2) of thyroid hormone receptor α1 and β1 on interaction with retinoid X receptor and corepressor SMRT and N-CoR"J Endocrinol. 167(2). 219-227 (2000)
• [文献書誌] Todate A,Nakamura H, et al.: "Incresed Numbers of Dendritic Cells in the Bronchiolar Tissue of Diffuse Pa nbronchiolitis."Am J Respir Crit Care Med. 162(1). 148-153 (2000)