2000 年度実績報告書

血液リポ蛋白非結合型Aβの解明と臨床応用

研究課題

研究課題/領域番号	12670592
研究機関	群馬大学
研究代表者	東海林幹夫群馬大学, 医学部, 講師 (60171021)
研究分担者	針谷康夫群馬大学, 医学部, 講師 (90165035)
キーワード	アルツハイマー病 / リポ蛋白 / Aβ / 血液 / マーカー
研究概要	血漿総Aβ40/42およびリポ蛋白非結合型Aβ40/42の測定には10mlのヒト血液を0.1%EDTA試験管に採取し,12時間以内に2,800回転,20分で血漿を遠心分離し,総Aβ40/42測定用に凍結保存した.白血球成分はDNA抽出後,PCR-RFLP法によってApolipoprotein E4 genotypeの解析をおこなった.リポ蛋白非結合型Aβ40/42の測定には血漿からsequence density floating超遠心法を用いてリポ蛋白分画を除去する(Koudinov A,BBRC1994).これにはpottasium blomideで血漿密度を1.25g/mlに調整した後,16℃で8時間100,000rpmで超遠心をおこない,密度1.25g/mlのinfranatantを回収して測定した.(2)Aβ40およびAβ42のELISAによる測定にはcaputure抗体としてBNT-77(Ab11-16),同定抗体としてペルオキシダーゼ標識抗Aβ40抗体(BA-27)および抗Aβ42抗体(BC05)を用いた.標準ペプチドはSigma社製Aβ40/42を用い,TMB発色試薬で発色し,450nmでプレートリーダーを用いて測定した.基礎的検討はすでにMatsubara E,et al:Ann Neurol 1999に報告した.(3)健常者の検討我々の施設で採取した若年者から高齢までの健常者約400例では血液総Aβ40/42とリポ蛋白結合型および非結合型は生理的に加齢とともに60歳代から増加したがこの変化は非結合型でより著明であった.(4)国内各施設から得られた約200例のDown症候群患者の血漿ではリポ蛋白結合型および非結合型Aβ40/42は2倍から3倍に上昇し,加齢ともに低下した.AD患者では発症の前で増加し,発症とともに低下してくることが明かとなった.この傾向は血漿リポ蛋白非結合型Ab40/42でより顕著であった.(5)家族性ADの検討本邦のAPP717変異家系(新潟,尼崎,東京家系)とpresenilin-1変異家系(大阪,兵庫,仙台,カナダ,アルゼンチン家系)の約20家系の家族性ADの血漿ではリポ蛋白結合型および非結合型Aβ40/42の増加が一部の症例で認められた.したがって,血漿Aβ40/42は(6)ADの生物学的マーカーとして有望と考えられた.

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Shoji M et al.: "The levels of cerebrospinal fluib Aβ40 and Aβ42 (43) are regulated age-dependaitly"Neuobiol Aging. 22. 209-215 (2001)
[文献書誌] Tomido koro Y,Shoji M et al.: "Aβamyloidosis iuduces the iuitial stage of tau accumlation in APP (sw) on ice"Newosei Lett. 299. 169-172 (2001)
[文献書誌] Kawarabayashi T,Shoji M et al.: "Age-dependent changes in brain, CSF, and plasma Amyloid βprotein in the Tg2576 transgenic Mouse model of Alzheimer's Disease."J Neurosei. 21. 372-381 (2001)
[文献書誌] Harigaya Y,shoji M et al: "Amyloid beta Protein Starting Pyroglutamate at Position 3 Is a Major Component of the Amyloid Deposits in the Alzheimer's Disease Brain."Biochem Biophys Res Commun. 276. 422-427 (2000)
[文献書誌] Shoji M et al: "Age-related amyloid β protein accumulation iuduces cellular death and macrophage activation is trasgenic mice"J Pathol. 191. 93-101 (2000)
[文献書誌] Shoji M et al: "Accumulation of NACP/α-synuclein in Lewy body disease and multiple system atrophy"J Neurol Neurosurg Psychiat. 68. 605-608 (2000)
[文献書誌] 東海林幹夫: "老年精神医学講座S9:アルツハイマー病(三好功峰,小阪憲司編)"中山書店. 264-275 (2000)
[文献書誌] 東海林幹夫: "アルツハイマー病のすべて(水澤英洋編)"星和書店. 300-316 (2000)

2000 年度 実績報告書

血液リポ蛋白非結合型Aβの解明と臨床応用

研究代表者

東海林 幹夫 群馬大学, 医学部, 講師 (60171021)

研究成果

[文献書誌] Shoji M et al.: "The levels of cerebrospinal fluib Aβ40 and Aβ42 (43) are regulated age-dependaitly"Neuobiol Aging. 22. 209-215 (2001)

[文献書誌] Tomido koro Y,Shoji M et al.: "Aβamyloidosis iuduces the iuitial stage of tau accumlation in APP (sw) on ice"Newosei Lett. 299. 169-172 (2001)

[文献書誌] Kawarabayashi T,Shoji M et al.: "Age-dependent changes in brain, CSF, and plasma Amyloid βprotein in the Tg2576 transgenic Mouse model of Alzheimer's Disease."J Neurosei. 21. 372-381 (2001)

[文献書誌] Harigaya Y,shoji M et al: "Amyloid beta Protein Starting Pyroglutamate at Position 3 Is a Major Component of the Amyloid Deposits in the Alzheimer's Disease Brain."Biochem Biophys Res Commun. 276. 422-427 (2000)

[文献書誌] Shoji M et al: "Age-related amyloid β protein accumulation iuduces cellular death and macrophage activation is trasgenic mice"J Pathol. 191. 93-101 (2000)

[文献書誌] Shoji M et al: "Accumulation of NACP/α-synuclein in Lewy body disease and multiple system atrophy"J Neurol Neurosurg Psychiat. 68. 605-608 (2000)

[文献書誌] 東海林幹夫: "老年精神医学講座S9:アルツハイマー病(三好功峰,小阪憲司 編)"中山書店. 264-275 (2000)

[文献書誌] 東海林幹夫: "アルツハイマー病のすべて(水澤英洋 編)"星和書店. 300-316 (2000)

2000 年度実績報告書

東海林幹夫群馬大学, 医学部, 講師 (60171021)

[文献書誌] 東海林幹夫: "老年精神医学講座S9:アルツハイマー病(三好功峰,小阪憲司編)"中山書店. 264-275 (2000)

[文献書誌] 東海林幹夫: "アルツハイマー病のすべて(水澤英洋編)"星和書店. 300-316 (2000)