心筋興奮収縮連関の分子機構の解明

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670664
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 大津 欣也 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (20294051)
• 研究分担者: 多田 道彦 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90093434)
• キーワード: カルシウム / 興奮収縮連関 / リアノジンレセプター / ソルシン / ノックアウトマウス

研究概要

本研究では心筋興奮収縮連関の分子機構さらにリアノジンレセプターの構造機能連関について検討を行うことを目的とした。
ディフィドロピリジンレセプターとリアノジンレセプターとの介在物質と考えられるソルシンのノックアウトマウスを作成した。マウスゲノミックライブラリーをスクリーニングすることによってマウスソルシン遺伝子の単離を行った。ATGを含む第2エキソンの両側にflox配列を挿入したコンストラクトをES細胞に導入し相同組換え体を得た。この組換えES細胞をマウス子宮に移植しキメラマウスを得た。さらにキメラマウスをC57BL6と交配しgerminal transmission体を得た。
リアノジンレセプターの第一エキソンにflox配列配列を挿入したマウスとミオシン軽鎖プロモーターの下流にCre recombinaseをノックインしたマウスを交配しヘテロタイプの心筋特異的ノックアウトマウスを得た。このマウスでは心筋リアノジンレセプターの発現は50%低下していた。しかし心エコー法で評価した心機能、心サイズとも有意な変化を認めなかった。さらに心機能を評価するため観血的にカテーテル法により左室内圧を測定したところ収縮期左室圧、拡張期圧とも有意差がなくまたdP/dt、-dP/dtとも有意差を求めなかった。他のカルシウムシグナリング蛋白質の発現を検討したがホスホランバン、CaATPase、カルセクエストリンの発現は特に変化を認めなかった。

研究成果

• [文献書誌] Yasushi Sakata: "Calcineurin Inhibitor Attenuates Left Ventricular Hypertrophy, Leading to Prevention of Heart Failure in Hypertensive Rats"Circulation. 102. 2269-2275 (2000)
• [文献書誌] Nobushige Yamashita: "The involvement of cytokines in the second window of ischemic Preconditioning"Br. J. Pharmacol.. 131. 415-422 (2000)
• [文献書誌] Shiro Hoshida: "FR167653, a cytokine-suppressive agent, reduces myocardial ischemia-reperfusion injury in rats"Cytokines Cell Mol Ther.. 6. 165-170 (2000)
• [文献書誌] Yasushi Matsumura: "Intracellular calcium level required for calpain activation in a single myocardial cell"J Mol Cell Cardiol.. 33. 1133-1142 (2001)
• [文献書誌] Shinichi Hirotani: "Involvement of NF-κB and ASK1 in G-Protein Coupled Receptor Agonist-Induced Cardiomyocyte Hypertrophy"Circulation. 105. 509-515 (2002)
• [文献書誌] Yoshiharu Higuchi: "Involvement of Reactive Oxygen Species-mediated NF-κB Activation in TNF-α-induced Cardiomyocyte Hypertrophy"J Mol Cell Cardiol. 34. 233-240 (2002)
• [文献書誌] Moto-o Date: "The Antioxidant N-2-Mercaptopropionyl Glycine Attenuates Left Ventricular Hypertrophy in in vivo Murine Pressure-Overload Model"J Am Coll Cardiol. 39. 907-912 (2002)