抗アポトーシス遺伝子の血管内皮導入による新たな動脈硬化の予防及び治療

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670678
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 菅野 公浩 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (20206395)
• 研究分担者: 畠中 正光 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (40253413) ; 牧野 直樹 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (60157170)
• キーワード: TNF-alphaレセプタ-1 / 血管内皮細胞 / 酸化LDL

研究概要

可溶性TNF-alphaレセプタ-1(sTNFR1)は、TNF-alphaレセプタ-1(TNFR1)の細胞外成分で、TNF-alphaに拮抗する。TNF-alphaに拮抗することにより、バルーン内皮障害において、血管内皮の再生をもたらすことが知られている。.しかしながら、sTNFR1そのものが、血管内皮細胞の増殖をおこすかどうかは、不明である。今回、我々は、sTNFR1そのものが、TNF-alphaに拮抗することなく、血管内皮細胞の増殖をおこすことを示した。(方法と結果)培地に加えたsTNFRIは、人臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)の増殖をおこした。次に、sTNFR1発現プラスミド(pcDNA3.1 plasmid)をHUVECにトランスフェクションした。sTNFR1をトランスフエクションしたHUVECは、コントロールプラスミドをトランスフェクションしたHUVECに比し、有意に増殖した。sTNFR1をトランスフェクションしたHUVECは、TNFR1 mRNAの細胞外成分は増加したが、TNFR1 mRNAの細胞内成分は変化しなかった。細胞培養の培地のsTNFR1もsTNFR1をトランスフェクションしたHUVECでは、増加していた。又、sTNFR1をトランスフェクションしたHUVECでは、TNFR1からのsTNFR1の分離も抑制されていた。(結論)これらの結果より、sTNFR1 geneのトランスフェクションは、TNF-alphaに拮抗するだけでなく、血管病変において治療の一つとなることが、示唆された。その他、sTNFR1をトランスフェクションしたHUVECは、酸化LDLによるアポトーシスに対し、TNFR1のshedding及ひLOX-1 mRNAを抑制し、予防的働く事を確認した。

研究成果

• [文献書誌] Masahiro Sugano,Shojiro Sawada,Keiko Tsuchida,Naoki Makino,Masafumi Kamada.: "Low density lipoproteins develop resistance to oxidative modification due to inhibition of cholesteryl ester transfer protein by a monoclonal antibody"J.Lipid.Res.. 41. 126-133 (2000)
• [文献書誌] Masahiro Sugano,Keiko Tsuchida,Shojiro Sawada,Naoki Makino.: "Reduction of plasma angiotensin II to normal level by antisense oligodeoxynucleotides against liver angiotensinogen can not completely attenuate vascular remodeling in spontaneously hypertensive rats"J.Hypertension.. 18. 725-731 (2000)
• [文献書誌] Masahiro Sugano,Keiko Tsuchida,Naoki Makino.: "High-density lipoproteins protect endothelial cells from tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis."Biochem Biophys Res Comm.. 272. 872-876 (2000)
• [文献書誌] Hiroyoshi Hirayama,Masahiro Sugano,Nobuyuki Abe,Hidetoshi Yonemochi,Naoki Makino.: "Determination of left ventricular mass by echocardiography in normotensive diabetic patients."Jpn Circ J.. 64. 921-924 (2000)
• [文献書誌] Hiroyoshi Hirayama,Masahiro Sugano,Nobuyuki Abe,Hidetoshi Yonemochi,Naoki Makino.: "Troglitazone, an antidiabetic drug, improves left ventricular mass and diastolic function in normotensive diabetic patients."Int J.Cardiol.. 77. 75-79 (2001)