| 研究概要 |
現在までに多数の好酸球遊走因子が報告されているが、皮膚のアレルギー反応部位における好酸球浸潤のメカニズムは明らかにされていない。今年度はマウスの皮膚の遅発型反応における好酸球浸潤に好酸球に特異的で強力な遊走因子であるeotaxinの発現、その産生細胞について研究を行った。Balb/cマウスにオボアルブミン(OVA)をアラムとともに2週おきに2回腹腔感作し、最後の免疫の2週後にOVA、コントロールとしてphosphate buffered saline(PBS)を皮内チャレンジした。アラムのみで免役した群にも同様にチャレンジした。皮内チャレンジ後、0,3,6,12,24時間後に生検し、組織中の好酸球浸潤数のカウントとRNA抽出を行った。chromotrope 2Rによる染色では12時間をピークとするOVA抗原特異的な好酸球浸潤がみられた。抽出したRNAでeotaxinのreverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR)を行った所、3時間後をピークとする早期の抗原特異的な発現を認めた。同時に好酸球遊走能をもつ他のケモカインについても検討したが、regulated upon activation in normal T-cells expressed and secreted(RAHTES)は12〜24時間がピークの遅い発現で抗原特異的ではなかった。macrophage inflammatory protein-1α(MIP-1α)はeotaxin同様、早期の抗原特異的発現がみられた。次にPCR productより、プローブを作成し、non-RIのin situ hybridizationをeotaxinについて行った。eotaxinのメッセージを認めたのは、表皮のケラチノサイト、真皮の線維芽細胞、真皮に浸潤する単核球(おそらくマクロファージやTリンパ球)であり、以上の細胞が皮膚におけるeotaxinの産生細胞と考えられた。
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