免疫組織染色を用いた実用的な癌の放射線感受性予測法の開発

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670892
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 坂田 耕一 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (10235153)
• 研究分担者: 晴山 雅人 札幌医科大学, 医学部, 教授 (10173098) ; 大内 敦 札幌医科大学, 医学部, 助手 (70168863) ; 永倉 久泰 札幌医科大学, 医学部, 助手 (80244359)
• キーワード: 放射線感受性 / 免疫組織染色 / 低酸素細胞 / 微小血管密度

研究概要

1.腫瘍内酸素分圧の測定及び生検標本の免疫組織染色
現在まで、12例の頭頸部癌や子宮頚部癌患者の腫瘍内の酸素濃度の測定を、放射線治療前に、ポーラログラフィック酸素センサーを用いて、施行した。酸素分圧測定後に、測定部位より、生検をおこない、また、血液を採取した。12例の腫瘍の酸素分圧は、20mmHgから70mmHgの間に分布していた。必ずしも、腫瘍の大きさと低酸素の程度は相関みられなかった。生検で得られた腫瘍組織を用いて、ABC法にて免疫組織染色を行い、ORP(oxygen regulated proteins)150、ORP80、ORP100、HIF1(hypoxia-inducible factor 1)、エリスロポイエチン、VEGF(vasculuar endothelial growth factor)、endothelin-1等の低酸素誘導蛋白質の発現をみ、酸素センサーで測定した各腫瘍の低酸素分画と各種の低酸素誘導蛋白質の発現との関係を解析し、その発現が、低酸素分圧と良好な相関を持つ蛋白質を選定する予定である。今年度は、この他に、以下を予定している。
2.低酸素誘導蛋白質の血中濃度測定法の確立
また、1で得られた血清より、1で挙げた蛋白質の血中濃度を測定し、血中の低酸素誘導蛋白質のうち、酸素センサーで測定した腫瘍の低酸素状態と相関する蛋白質を選定する。
3.電子スピン共鳴法を用いた腫瘍の酸素濃度測定
in vivo電子スピン共鳴装置を用いて、腫瘍細胞中の酸素濃度を測定する。酸素濃度測定用のプローベ(酸素濃度によりそのスペクトル特性が変化する物質)を頭頸部癌、皮膚癌や子宮頸部癌などに塗布し、そのESRスペクトルから酸素濃度を決定する。この結果とポーラログラフィック酸素センサーで測定した酸素分圧値とを比較する。

研究成果

• [文献書誌] K.-I.Sakata,Y.Matsumoto,H.Tauchi,M.Satoh,A.Oouchi,H.Nagakura,K.Koito,Y.Hosoi,N.Suzuki,K.Komatsu,and M.Hareyama: "Expression of Genes Involved in Repair on DNA Double-strand Reuks in Normal and Tumor Tissues"International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 49・1. 161-167 (2001)