アルツハイマー病脳の酸化的傷害に関する免疫組織化学的検討

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670918
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 布村 明彦 旭川医科大学, 医学部, 講師 (60241436)
• 研究分担者: 千葉 茂 旭川医科大学, 医学部, 教授 (90171941)
• キーワード: Alzheimer's disease / Amyloid-β / Down's syndrome / 8-hydroxyguanosine / Nitric oxide / Nitrotyrosine / Oxidative damage / Oxidative stress

研究概要

最近、われわれは、孤発性アルツハイマー病(SAD)において、大脳皮質神経細胞内にRNAの酸化によって生じる8-hydroxyguanosine(8OHG)が出現することを明らかにした。本研究では、SAD脳、家族性アルツハイマー病(FAD)脳、およびダウン症候群(DS)脳における8OHGの発現とアミロイドβ(Aβ)沈着との関連性について検討した。
プレセニリン-1(PS-1)変異を有するFAD(PS-1FAD)群12例(年齢47-81歳)、SAD群22例(57-93歳)、DS群22例(0.3-64歳)、非痴呆群40例(0.3-86歳)の剖検脳をMethacarnあるいは中性ホルマリンで固定した。パラフィン包埋後に厚さ6μの切片を作製し、1F7(抗8OHG)、4G8(抗Aβ)、BC05(抗Aβ42)およびBA27(抗Aβ40)による免疫染色を行った。海馬支脚錐体細胞層あるいは大脳新皮質第3層において、8OHGの免疫反応強度(Optical Density)ならびにAβ沈着密度をQ500IW-EX(Leica)を用いて解析した。
SADおよびDSにおける神経細胞内8OHG免疫反応性は、対照群に比べて有意に増強していた。一方、PS-1FADでは、12例中4例で対照群よりも高い8OHG免疫反応が認められたが、群全体としては対照群との間に有意差は認められなかった。SADおよびDSではAβ沈着量と神経細胞内8OHG免疫反応性との間に有意な逆相関が認められ、DSではAβ沈着が高度になる30歳代以前に8OHGが高度に発現していた。PS-1FADでは、Aβ42沈着量と8OHGとの間に逆相関の傾向が認められた。
以上の結果から、神経細胞内RNAの酸化は、SADやDSにおいて病理学的カスケードの上流で生じると考えられた。また、Aβ沈着は、酸化的ストレスに対する防御反応である可能性も示唆された。

研究成果

• [文献書誌] A.Nunomura: "Neuronal oxidative stress precedes amyloid-β deposition in Down syndrome"Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 59・11. 1011-1017 (2000)
• [文献書誌] A.Nunomura: "Increasing amyloid β 42 deposition is associated with decreasing neuronal RNA oxidation in Down's syndrome and familial Alzheimer's disease"Brain Pathology. 10・4. 783 (2000)
• [文献書誌] M.P.Cuajungco: "Evidence that the β-amyloid plaques of Alzheimer's disease represent the redox-silencing and entombment of Aβ by zinc"Journal of Biological Chemistry. 275・26. 19439-19442 (2000)
• [文献書誌] G.Perry: "Oxidative damage in Alzheimer's disease : the metabolic dimension"International Journal of Developmental Neuroscience. 18・4-5. 417-421 (2000)
• [文献書誌] C.A.Rottkamp: "Oxidative stress, antioxidants, and Alzheimer disease"Alzheimer Disease and Associated Disorders. 14・Suppl-1. S62-S66 (2000)
• [文献書誌] M.A.Smith: "Oxidative stress in Alzheimer's disease"Biochimica et Biophysica Acta. 1502・1. 139-144 (2000)
• [文献書誌] G.Perry: "Free Radicals in Chemistry, Biology, and Medicine"OICA International (London). 7 (2000)
• [文献書誌] G.Perry: "Les Amyloses"Medicine-Sciences Flammarion (Paris). 6 (2000)