変異FLT3分子シグナルがもたらす細胞増殖・分化の脱制御機構の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670982
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 清井 仁 名古屋大学, 医学部, 講師 (90314004)
• 研究分担者: 直江 知樹 名古屋大学, 医学部, 助教授 (50217634)
• キーワード: FLT3 / tandem duplication / 点突然変異 / チロシンキナーゼ / 白血病

研究概要

急性骨髄性白血病の約20%に認められるFLT3遺伝子の部分的なtandem duplication(FLT3/ITD)は、臨床的に、初診時末梢白血病細胞数と強い相関関係を有し、独立した新たな予後不良因子であり、この遺伝子異常が白血病細胞の増殖機構に深く関与していることを示してきた。本研究においては、FLT3遺伝子異常と活性化機構の関連を検討した。まず、我々は、傍膜貫通(JM)領域のITD変異以外にキナーゼ領域における点突然変異が急性白血病症例の約7%に存在し、その変異がFLT3分子の恒常的活性化をもたらし、IL3依存性細胞株32Dに発現させることにより、32D細胞をトランスフォームさせることを明らかにした。次に、FLT3分子の活性化におけるJM領域の役割を明らかにするために、JM領域のITD、欠失、点突然変異FLT3分子を作製し、その活性化機構を検討したところ、JM領域は二量体形成において重要な役割を果たし、また、野生型JM領域はリガンド非存在下におけるFLT3分子の自己活性化能を抑制していることを示唆する結果を得る一方、ITDや欠失変異体においては、その長さ、部位に関係なく二量体を形成し恒常的活性化をもたらしていることが明らかとなった。また、これら変異FLT3分子を32D細胞に発現させると、MAPK、STAT5、SHCなどのシギナル伝達分子の活性化が同様に認められた。これらの結果により、FLT3JM領域はその長さが変化することにより、FLT3分子の恒常的な二量体形成を誘導することによりキナーゼの活性をもたらすことが考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Yamamoto Y: "Activating mutation of D835 within the activation loop of FLT3 in human hematological malignancies"Blood. 97. in press (2001)
• [文献書誌] Naoe T: "Analysis of genetic polymorphism in NQO1, GST-M1, GST-T1, and CYP3A4 in 469 Japanese patients with therapy-related leukemia/myelodysplastic syndrome and de novo acute myeloid lcukemia"Clin Cancer Res.. 6(10). 4091-4095 (2000)
• [文献書誌] Naoe T: "Leukemia Relapse Reconsidered from the Molecular Aspect."Leuk Lymphoma.. 37(5-6). 527-534 (2000)
• [文献書誌] Kitamura K: "Histone deacetylase inhibitor but not arsenic trioxide differentiates acute promyelocytic leukaemia cells with t (11;17) in combination with all-trans retinoic acid."Br J Haematol.. 108(4). 696-702 (2000)
• [文献書誌] Zhao M: "In vivo treatment of mutant FLT3-transformed murine leukemia with a tyrosine kinase inhibitor."Leukemia.. 14(3). 374-378 (2000)
• [文献書誌] Hayakawa F: "Tandem-duplicated Flt3 constitutively activates STAT5 and MAP kinase and introduces autonomous cell growth in IL-3-dependent cell lines."Oncogene.. 19(5). 624-631 (2000)