膜糖蛋白GPVの血小板活性化のnegative regulatorとしての機能-GPVの細胞内ドメイン結合蛋白の同定-

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12670990
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 藤村 欣吾 広島大学, 医学部, 教授 (80034114)
• 研究分担者: 下村 壮司 広島大学, 医学部・付属病院, 助手 (20263741) ; 藤元 哲郎 広島大学, 医学部, 助教授 (00221549)
• キーワード: 血小板 / GPV / フォンヴィルブランド因子受容体 / Two hybrid system / 情報伝達 / FBLP-1 / 細胞内ドメイン / フィラミン

研究概要

血小板GPVの血小板活性化における役割を明らかにするために、GPVの細胞内ドメインと結合する蛋白をBacteria two hybrid systemを用いてスクリーニングを行い、1つの陽性クローンを得た。またフォンヴィルブランド因子受容体であるGPIb/V/IX複合体の細胞内結合蛋白フィラミンBと相互作用する蛋白をyeast two hybrid systemを用いたスクリーニングで同定した。フィラミンBは細胞骨格と膜蛋白とのCross linkingに関与するScaffolding蛋白としての機能を持つが、今回得られたクローンはフィラミンBの中央部分と相互作用し、cDNAの全長1360bp、374個のアミノ酸をコードする分子量約45kDaの蛋白で、N末にプロリンリッチドメイン、C末に2つのLIMドメインを持つZyxin、Paxillin類似の全く新しい蛋白であり、FBLP-1(Filamin Binding LIM Protein-1)と名付けた。Northern blot及びRT-PCRの結果、FBLP1は種々の臓器や、血小板及び巨核球を含む多くの細胞に広く発現し、細胞内局在では、Spreadした細胞のFocal adhesionから伸びるストレスファイバーにそって存在し、フィラミンおよびアクチンとco-localizeしていた。またFBLP-1を過剰発現した細胞は発現していない細胞に比べよりspreadすることが観察された。従ってFBLP-1は細胞接着の制御に関わり、GPIb-IX-V複合体から細胞内へのシグナルが血小板活性化、粘着反応を引き起す過程で重要な役割を演じていると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Fujimoto, T.T., et al.: "Involvement of Fcγ receptor polymorphism in the therapeutic response of idiopathic thrombocvtopenic purpura."Br. J. Haematol.. 115. 125-130 (2001)
• [文献書誌] Niiya K., et al.: "Two novel gene mutations in type I antithrombin deficiency"Int. J. Hematol.. 74. 469-472 (2001)
• [文献書誌] Fujimoto, T.T., et al.: "Novel alternatively spliced form of β_3-endonexin."Thromb. Res.. 105. 63-70 (2002)
• [文献書誌] Hino A., et al.: "Effects of deoxycholic acid and its epimers on lipid peroxidation in isolated rat heatocytes"J. Bicchem.. 129. 683-689 (2001)
• [文献書誌] Kim H-G., et al.: "Hypocholesterolemic effect of bile acid sulfonate analogs in hamsters."Biol. Pharm. Bull.. 24. 218-220 (2001)
• [文献書誌] 藤村 欣吾: "巨大血小板症候群"総合臨床. 50. 2871-2872 (2001)
• [文献書誌] 藤元 貴啓: "血小板産生異常と巨大血小板.細胞の形態形成の基本メカニズム"金芳堂,京都. 163-175 (2001)