| 研究概要 |
1.WECHEトランスジェニックマウス(WECHE Tg)の作製
(1)全身性に発現することが確認されているchicken β-actinプロモーター(CAGプロモーター)にWECHE cDNAを組み込んでCAG-WECHE Tgの構築を作製した.実際,トランスジェニックマウス作製を行う前に,NIH3T3細胞に,この構築を遺伝子導入し,細胞における発現を確認した.その結果,CAG-WECHE Tgを遺伝子導入したものにおいてのみ,ベクターのみの遺伝子導入と比較して,WECHE蛋白質の産生を,ウエスタンブロッティング法により確認した.この構築を用いて,実際にWECHE Tg作製を行う予定である.
(2)in vitroでの血管内皮前駆細胞の増殖・分化実験において,WECHE蛋白質は,卵黄嚢由来血管内皮細胞の増殖を抑制することが分かっている.このことから,WECHEの発現がマウス胎仔期における血管新生に対して,どのような影響を及ぼすのかについて,Tgマウスを作製して解析する.現在,血管内皮細胞に特異的なプロモーターにWECHE cDNAを組み込む構築を作製中である.
2.WECHEレセプターの探索
(3)WECHEレセプターのクローニング
通常のケモカインには,それぞれ特異的なレセプターが存在せず,互いに共通のレセプターを介して,細胞に作用していることが分かっている.しかし,WECHEレセプターは未だ分かっておらず,新規のケモガインレセプターである可能性が考えられる.WECHE添加により細胞遊走能を示す造血細胞からcDNAライブラリーを作製するための準備を進めている.
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