| 研究概要 |
私どもは、プロラクチン(PRL)遺伝子5'上流配列のPit-1結合DNAエレメントの結合する新規転写因子mPOUをクローニングしたが、このmPOUの生理的病理的意義を明らかにするため以下の検討を行なった。
種々のレポーター遺伝子を使用した一過性発現実験系で、Pit-1によって発現が制御される遺伝子のうち、PRL遺伝子に対しては、mPOUはPit-1と相乗的に発現を活性化することがわかった。成長ホルモン(GH)遺伝子に対しては、mPOUとPit-1は相加的に活性化した。一方、GH-releasing hormone受容体遺伝子に対しては、明確な作用を示さなかった。mPOUとPit-1はヘテロダイマー形成する証拠はなく、PRL遺伝子に対するmPOUおよびPit-1の相乗効果の機構は不明である。また、Pit-1の標的遺伝子に対してもmPOUの効果が異なるが、その機構も現在のところ不明である。
mPOUの一部のアミノ酸配列とヘモシアニンをコンジュゲートさせた後、家兎に免疫し、抗mPOU抗血清を得た。これを用いて、ヒト下垂体腺腫にmPOUが存在するか検討した。PRLおよびGH産生腺腫ではmPOU様免疫活性が核内だ存在した。一方、非機能性腺腫、FSH産生腺腫ではmPOU様免疫活性が検出できなかった。この成績とmPOUはPRL。GH遺伝子発現を促進するという一過性発現系での成績を総合すると、mPOUは下垂体PRL, GH産生細胞においてPRL、GH遺伝子発現を促進する方向に作用しているものと考えられる。
mPOUの生理的意義を明確にするため、mPOU遺伝子をGFPcDNAで置換させるGFPノックインターゲテイングベクターを作製している。GFPがmPOUに置き換わったノックアウトマウスを用いることにより、mPOUの生理的意義だけでなく、mPOUの時間的空間的発現様式も容易に検討できるものと考えられる。
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