2001 年度実績報告書

ヒト成長ホルモン分泌促進物質(GHS)受容体遺伝子転写調節の分子機構

研究課題

研究課題/領域番号	12671086
研究機関	兵庫県立看護大学
研究代表者	加治秀介兵庫県立看護大学, 看護学部, 助教授 (90224401)
研究分担者	千原和夫神戸大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00107955)
キーワード	GH分泌促進物質 / グレリン / 受容体 / 遺伝子 / 転写調節 / 転写因子 / 肝細胞
研究概要	前年度は成長ホルモン分泌促進物質受容体(GHS-R)遺伝子の下垂体細胞GH3における転写調節について報告した。本年度は下垂体以外、特に肝細胞におけるグレリンの新しい作用の発見とGHS-R遺伝子転写について報告する。RT-PCR法によりヒト肝細胞、ヒト肝癌細胞HepG2、ラット肝癌細胞H4-II-E細胞においてGHS-R mRNA発現を認めた。これらの細胞においてグレリンはインスリンによるIRS-1のチロシンリン酸化、IRS-1とGRB2ないしP13-Kとの会合、MAPKの活性化を促進し、さらにMAPKの活性化を介してHepG2細胞の増殖を促進するなどインスリン様作用が認められた。一方グレリンはH4-II-E細胞においてインスリンによるAkt kinase活性化、すなわちグリコーゲン合成促進作用に拮抗すること、さらにインスリンによるPEPCK遺伝子発現の抑制、すなわち糖新生抑制作用に拮抗するなど抗インスリン作用の可能性も示唆された。そこで次にHepG2細胞におけるGHS-R遺伝子転写について検討した。GHS-R遺伝子上流の各断片をルシフェラーゼをレポーターとするベクターに組み込みdual luciferase assayを行った。-1224、-669,-608GHS-R/Luc活性は漸増し、コントロールのpGL3Basic vectorに比し約5倍であった。-475,-445GHS-R/Lucでもほぼ同じ値であり、GHS-R遺伝子の転写に関わる領域はGH3細胞と異なり、より近位にあると考えられた。この結果よりHepG2細胞に特異的な転写因子ないしその関連因子の関与が示唆された。GH3細胞でBay K8644/TPAがGHS-R/Luc活性を抑制したので、1-100nMグレリンのGHS-R/Luc活性への効果を検討したが、明らかな変化を認めなかった。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Kaji H, Sugimoto T, Nakaoka D, Okimura Y, Kaji H, Chihara K et al.: "Bone metabolism and body composition in Japanese patients with active acromegaly"Clinical Endocrinology(Oxf). 55. 175-181 (2001)
[文献書誌] Murata M, Kaji H, Iida K, Okimura Y, Chihara K: "Dual action of eicosapentaenoic acid in hepatoma cells"The Journal of Biological Chemistry. 276. 31422-31428 (2001)
[文献書誌] Kaji H, Kishimoto M, Kirimura T, Chihara K et al.: "Hormonal regulation of the human ghrelin receptor gene transcription"Biochemical and Biophysical Research Communications. 284. 660-666 (2001)
[文献書誌] Mizuno I, Takahashi Y, Okimura Y, Kaji H, Chihara K: "Upregulation of the klotho gene expression by thyroid hormone and during adipose differentiation in 3T3-L1 adipocytes"Life Sciences. 68. 2917-2923 (2001)
[文献書誌] Murata M, Okimura Y, Kaji H, Kanagawa K, Chihara K et al.: "Ghrelin modulates the downstream molecules of insulin signaling in hepatoma cells"The Journal of Biological Chemistry. 277. 5667-5674 (2002)
[文献書誌] 飯田啓二, 高橋裕, 加治秀介, 置村康彦, 千原和夫他: "成長ホルモン(GH)不応症で見いだされた新しいGH受容体遺伝子変異"日本内分泌学会雑誌. 77. 48-50 (2001)

2001 年度 実績報告書

ヒト成長ホルモン分泌促進物質(GHS)受容体遺伝子転写調節の分子機構

研究代表者

加治 秀介 兵庫県立看護大学, 看護学部, 助教授 (90224401)

研究成果

[文献書誌] Kaji H, Sugimoto T, Nakaoka D, Okimura Y, Kaji H, Chihara K et al.: "Bone metabolism and body composition in Japanese patients with active acromegaly"Clinical Endocrinology(Oxf). 55. 175-181 (2001)

[文献書誌] Murata M, Kaji H, Iida K, Okimura Y, Chihara K: "Dual action of eicosapentaenoic acid in hepatoma cells"The Journal of Biological Chemistry. 276. 31422-31428 (2001)

[文献書誌] Kaji H, Kishimoto M, Kirimura T, Chihara K et al.: "Hormonal regulation of the human ghrelin receptor gene transcription"Biochemical and Biophysical Research Communications. 284. 660-666 (2001)

[文献書誌] Mizuno I, Takahashi Y, Okimura Y, Kaji H, Chihara K: "Upregulation of the klotho gene expression by thyroid hormone and during adipose differentiation in 3T3-L1 adipocytes"Life Sciences. 68. 2917-2923 (2001)

[文献書誌] Murata M, Okimura Y, Kaji H, Kanagawa K, Chihara K et al.: "Ghrelin modulates the downstream molecules of insulin signaling in hepatoma cells"The Journal of Biological Chemistry. 277. 5667-5674 (2002)

[文献書誌] 飯田啓二, 高橋 裕, 加治秀介, 置村康彦, 千原和夫 他: "成長ホルモン(GH)不応症で見いだされた新しいGH受容体遺伝子変異"日本内分泌学会雑誌. 77. 48-50 (2001)

2001 年度実績報告書

加治秀介兵庫県立看護大学, 看護学部, 助教授 (90224401)

[文献書誌] 飯田啓二, 高橋裕, 加治秀介, 置村康彦, 千原和夫他: "成長ホルモン(GH)不応症で見いだされた新しいGH受容体遺伝子変異"日本内分泌学会雑誌. 77. 48-50 (2001)