| 研究概要 |
【目的】昨年度の研究により、高グルコース条件下ではラットシュワノーマ細胞(JS-1細胞)の細胞増殖能およびPKC-α活性が低下すること、またこれらの異常がポリオール代謝活性の亢進を介していることが明らかとなった。PKC-MAPKカスケードは、細胞の増殖・分化・アポトーシスに重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では、神経系細胞における高グルコースがPKC-α-MAPKカスケードと細胞増殖能に及ぼす効果について検討した。
【方法】1)JS-1細胞を5.5mMあるいは20mMグルコース(G)条件下でアルドース還元酵素阻害薬(エパルレスタット:Ep;1μM)の存在下・非存在下で14日間培養、またはPKC-αアンチセンス処理あるいはp38MAPK特異的阻害剤であるSB203580(SB)処理を行った。2)細胞増殖能は[^3H]-thymidine取り込み能で、MAPK活性はリン酸化/総MAPK蛋白発現量で評価した。
【結果】1)p38活性は20mMG条件下で著明に低下し(5.5mMG;100%,20mMG;56.0±7.1,p<0.05)、Epによりその低下が抑制された(Ep;90.2±6.1)。2)PKC-αアンチセンス処理によりPKC-αのみならずp38MAPK活性は濃度依存性に低下した。3)PKC-αアンチセンス処理により細胞増殖能は濃度依存性に低下した(0μM;100%,0.5μM;88.5±2.2,2.5μM;46.0±5.8,5μM;9.2±1.4)。4)SB処理により細胞増殖能は濃度依存性に低下した(0μM;100%,0.1μM;76.1±7.6,1μM;59.0±2.2,10μM;22.3±2.2)。
【結論】これらの結果より、高グルコース条件下の神経系細胞ではポリオール代謝活性の亢進を介してPKC-αおよびp38MARK活性が低下することにより細胞増殖能が低下することが明らかとなり、糖尿病性神経障害の発症・進展に高グルコースによるポリオール代謝活性の亢進を介したPKC-α、p38活性の低下が関与することが示唆された。
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