微小転移制御をめざした癌外科治療法の確立

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12671156
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 藤原 義之 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (40314330)
• 研究分担者: 塩崎 均 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (70144475) ; 中森 正二 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (70294080) ; 門田 守人 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (00127309) ; 矢野 雅彦 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70273646) ; 井上 雅智 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (80232560)
• キーワード: 遺伝子診断 / 微小転移 / RT-PCR / 消化器癌 / 肺癌 / 乳癌 / リンパ節転移 / 腹腔洗浄液

研究概要

各種固形癌(胃癌、食道癌、大腸癌、肺癌、膵臓癌、肝癌、胆道癌、乳癌)の微小転移検出を目的としたMultiple-marker RT-PCR assay法を確立した。癌患者の手術時の郭清リンパ節あるいは、血液サンプルを用いてこの遺伝子診断による微小転移検出を行いその有用性を証明した。(Int.J Cancer,2001,Cancer,2000,Clin.Cancer Res.,2000,Int.J.Oncol.,2000,Digest.Dis.Sci.,2000)遺伝子診断における、至適サンプリング法の確立を行い報告した。(Cancer letter,2000)
遺伝子診断の臨床応用のために、リアルタイムモニタリングシステムによる遺伝子マーカーの定量的検出法と、術中診断を可能にするためのキャピラリーPCRを用いた迅速診断法を確立した。このシステムを用いた癌治療への臨床応用として、術中迅速遺伝子診断法によるリンパ節微小転移診断に基づく、食道癌のリンパ節郭清範囲の決定の有用性の検討を行った。従来、頸部リンパ節転移のセンチネルノードとして、迅速病理診断を行っていた反回神経周囲リンパ節の迅速遺伝子診断により、リンパ節の個数にして、22個/68個(22%)、症例数にして、12例/31例(39%)が新たに転移陽性となった。実際に、これらの12症例のうち3例に頸部転移、あるいは再発を認め、残りの19例には認めなかった。これについては学会発表を行うとともに現在論文作成中である。又、高度進行胃癌を対象とした、化学療法の効果判定として、laparoscopy下に採取した腹腔洗浄液を用いた、癌細胞の定量的遺伝子診断法を確立し、この有効性を学会発表、論文にまとめる予定である。

研究成果

• [文献書誌] Iwao K.,Watanabe T.,Fujiwara Y., et al.: "Isolation of a novel human lung-specific gene, LUNX, a potential molecular marker for detection of micrometastasis in non-small cell lung cancer."Int.J.Cancer. 91. 433-437 (2001)
• [文献書誌] Miyamoto A.,Fujiwara Y., et al.: "Development of a multiple marker RT-PCR assay for detection of micrometastases of hepatocellular carcinoma."Dig.Dis.Sci.. 45. 1376-1382 (2000)
• [文献書誌] Okami J.,Dohno K.,Fujiwara Y., et al.: "Genetic Detection for Micrometastasis in Lymph Node of Biliary Tract Carcinoma."Clin.Cancer Res.. 6. 2326-2332 (2000)
• [文献書誌] Bilichik A.,Miyashiro M.,Fujiwara Y., et al.: "Molecular detection of metastatic pancreatic carcinoma cells using a multimarker reverse transcriptase-polymerase chain reaction assay."Cancer. 88. 1037-1044 (2000)
• [文献書誌] Fujiwara Y.,Ooka M., et al.: "Prevention of cross-contamination during sampling procedure in molecular detection for cancer micrometastasis."Cancer Letters. 29;153(1-2). 109-111 (2000)
• [文献書誌] Miyake Y,Fujiwara Y, et al.: "Quantification of micrometastases in lymph nodes of colorectal cancer using real-time fluorescence polymerase chain reaction."Int J Oncol. 16(2). 289-293 (2000)
• [文献書誌] Aihara T.,Fujiwara Y., et al.: "Mammaglobin B gene as a novel marker for lymph node micrometastasis in patients with abdominal cancers."Cancer Letters. 150. 79-84
• [文献書誌] Fujiwara Y.,Sugita Y., et al.: "Assessment of Stanniocalcin-1 mRNA as a molecular marker for micrometastases of various human cancers."Int.J.Oncol.. 16. 799-804