腫瘍拒絶抗原遺伝子・サイトカイン遺伝子導入樹状細胞による免疫遺伝子治療の基礎研究

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12671170
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 岩橋 誠 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (70244738)
• 研究分担者: 谷 眞至 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (60236677) ; 山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190)
• キーワード: 免疫遺伝子治療 / 樹状細胞 / アデノウイルスベクター / 腫瘍抗原遺伝子 / GM-CSF / 遠心法

研究概要

本年度は,腫瘍抗原gp70(env-1)遺伝子を導入したDC (DC-AxCAgp70)を用いた抗腫瘍効果を,将来の臨床応用を想定した大腸癌同所移植モデルを用いて,腫瘍抗原ペプチドをパルスしたDC (DC/AH-1)を用いたペプチドワクチン療法と比較検討した.また,腫瘍抗原遺伝子を導入することによるDCの活性化についても,DCのリンパ節への遊走に関係するケモカインレセプターであるCCR7の発現,所属リンパ節への遊走能に関して検討した.【方法】1)CT26のマウス大腸癌同所移植モデルにDC-AxCAgp70、DC-AxCAgp70/mGM-CSFおよびDC/AH-1を接種し,腫瘍の増殖抑制効果と予後を比較した.2)DCのCCR7の発現をDC-AxCAgp70,DC-AxCAgp70/mGM-CSFおよびDC/AH-1にて解析し,さらにそれぞれのDCを蛍光色素にてラベル後,皮卞接種し,リンパ節への遊走能をFACSにて比較した.【結果】1)大腸癌同所移植モデルにおいて,DC-AxCAgp70接種では,DC/AH-1接種と比較して腫瘍の増殖を著しく抑制し(P<0.0001),予後も延長し,GM-CSFの同時導入DC接種では,さらに抗腫瘍効果は増強した.2)DC/AH-1ではCCR7の発現は認めなかったのに対し,DC-AxCAgp70では強い発現を認め,GM-CSFの同時導入DCではさらに強い発現を認め、リンパ節への遊走も増強を認め,それが著しい抗腫瘍効果の一因であると考えられた.【結語】腫瘍抗原遺伝子導入DCは,抗原ペプチドをパルスしたDCによるワクチン療法よりも強い腫瘍増殖抑制効果を示し,生存期間も延長した.さらに同時にGM-CSF遺伝子を導入することにより,抗腫瘍効果の増強を認めた.本年度で得られた結果は,本年度の目標を達成できており,今後,腫瘍抗原遺伝子導入DCにサイトカイン遺伝子を導入した免疫遺伝子治療は,消化器癌において有用な治療法となり得ると期待された.

研究成果

• [文献書誌] Nakamura M et al.: "Dendritic cells genetically engineered to express simultaneously endogenous tumor antigen and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor elicit potent therapeutic antitumor immunity"Chin Cancer Res. 8. 2742-2749 (2002)
• [文献書誌] Ueda K et al.: "Improvement of carcinoembryonic antigen-specific prodrug gene therapy for experimental colon cancer"Surgery. (in press).
• [文献書誌] Nagata T et al.: "Overexpression of pyrimidine nucleoside phosphorylase enhances the sensitivity to 5'-deoxy-5-fluorouridine in tumour cells in vitro and in vivo"Eur J Cancer. 38. 712-717 (2002)
• [文献書誌] Shono Y et al.: "Specific T-cell immunity against Ki-ras peptides in patients with pancreatic and colorectal cancers"Br J Cancer. 24・88. 530-536 (2003)
• [文献書誌] Yamaue H et al.: "Locoregional chemotherapy for patients with pancreatic cancer intra-arterial adjuvant chemotherapy after pancreatectomy with portal vein resection"Pancreas. 25. 366-372 (2002)
• [文献書誌] Nakamori M et al.: "Dose of adenoviral vectors expressing. interleukin-2 plays an important role in combined gene therapy with Cytosine deaminase/5-fluorocytosine : preclinical consideration"Jpn J Cancer Res. 93. 706-715 (2002)