膵胆道癌の浸潤転移の阻止(肝細胞増殖因子を標的とした新治療)

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12671286
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 志村 英生 福岡大学, 医学部, 助教授 (80178996)
• 研究分担者: 池田 靖洋 福岡大学, 医学部, 教授 (40038758) ; 中村 浩 福岡大学, 医学部, 助手 (60309911)
• キーワード: 肝細胞増殖因子 / アンタゴニスト / 遺伝子治療 / 膵胆道癌

研究概要

平成12年度は、予後の悪い胆道癌や膵癌の治療法開発を目的に、その癌進展を誘導している肝細胞増殖因子(HGF)を標的にした以下の基礎研究を行った.
我々の開発したHGFのアンタゴニスト(HGF/NK4)を培養癌細胞もしくは癌周囲の正常組織由来の培養細胞に遺伝子導入して、その発現と癌浸潤阻止効果を測定した.まず主に我々が樹立した胆道癌細胞株(GB-d1,GB-h3,FU-GBC-1、FU-GBC-2、CC-t6、HU-CCT-1)を用いて、HGF/NK4発現プラスミドをelectroporation法で導入して選択培地で発現株を選択した.得られた細胞亜株にはベクターが導入されていたが培地へのNK4発現量は極めて少なく、癌の浸潤を阻止できなかった.発現プロモーターなどの活性が適切でない可能性があった.正常のヒト中皮細胞への遺伝子導入は細胞の増殖率が悪いため導入細胞の選択は成功しなかった.そこでstableな遺伝子発現株の作製に代え、遺伝子発現が高く蛋白の産生効率の良いウイルス感染法を試みた.HGF/NK4遺伝子を組み込んだアデノウィルスAdCMV.NK4(東北大学貫和教授より供与)を上記癌細胞や中皮細胞に感染させ培地中のNK4の発現を測定した.GB-d1細胞の感染では遺伝子導入時に比べ数100倍のNK4発現量を2-3週間持続し、マトリゲル浸潤法で測定した癌の浸潤は阻止された.正常中皮細胞への感染では癌細胞に比べNK4発現量が少なかったが、細胞毒性は少なく次年度の動物実験が可能と考えられた.

研究成果

• [文献書誌] Kuba,K.,Matsumoto,K.,Date K.,Shimura H.,Tanaka M.,and Nakamura M.: "HGF/NK4, a four-kringle antagonist of hepatocyte growth factor, is an angiogenesis inhibitor that suppresses tumor growth and metastasis in mice."Cancer Research. 60:. 6737-6743 (2000)