| 研究概要 |
背景、目的:急性炎症における好中球の炎症部位浸潤については血管内皮細胞へのrollig, adhesion, transmigrationといった過程が存在することが知られている。HUVEC及びpolycarbonate membrane chamberによる血管外遊走モデルを用い,血管内皮細胞の能動的機能からみた好中球血管外遊走、特にRho, Rho kinaseを介した経路について解析した。
方法:C3transferase(Rho inhibitor), Y-27632(Rho kinase inhibitor), ML-7(MLCK inhibitor)の血管内皮細胞前処置後transmigration assayを施行し,好中球の血管内皮細胞下への遊走の際における1)組織切片上の血管内皮細胞下へ遊走した好中球のカウント、2)蛍光染色を用いた血管内皮細胞内F-actin, Myosin IIの分布変化、3)免疫沈降法を用いた血管内皮細胞内MLCのリン酸化を解析した。
結果:transmigration assayにおいて、好中球の血管内皮細胞下への遊走、その際の血管内皮細胞内F-actin, Myosin IIの活性化、血管内皮細胞内MLCリン酸化が確認された。また血管内皮細胞のみの各抑制剤前処置によって,好中球の血管内皮細胞下への遊走、血管内皮細胞内F-actin, Myosin IIの活性化、血管内皮細胞内MLCリン酸化が有意に抑制された。
結語:血管内皮細胞内Rho, Rho kinaseを介した情報伝達経路は好中球血管外遊走において重要な役割を担っていると考えられた。
以上の結果を総括、control studyも含めた追加実験を行い、American Thoracic Society Interntional conference2001において発表。さらにJournal of Leukocyte Biologyに投稿、in pressである。
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