TNFファミリー遺伝子発現による抗原提示能の強化を利用した肺癌に対する遺伝子治療

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12671337
• 研究機関: 千葉県がんセンター
• 研究代表者: 越川 信子 千葉県がんセンター, 病理研究部, 上席研究員 (90260249)
• 研究分担者: 藤澤 武彦 千葉大学, 大学院・医学研究院・胸部外科学, 教授 (80110328) ; 飯笹 俊彦 千葉大学, 大学院・医学研究院・胸部外科学, 助手 (10272303) ; 田川 雅敏 千葉県がんセンター, 病理研究部, 部長 (20171572)
• キーワード: 遺伝子治療 / Fasリガンド / 肺がん / 肺転移 / 抗原提示 / 樹状細胞 / TNF-α

研究概要

抗原提示の主たる役割を担う樹状細胞の活性化を遺伝子導入によって行ない、細胞性免疫の増強による、肺がんに対する治療の確立を目的とした。そのために、Fasリガンド遺伝子を肺がん細胞に導入発現させ、樹状細胞の表面に発現されているFas分子を介する活性化が可能であるか、あるいは樹状細胞の成熟化に深く関与するTNF-αの遺伝子を腫瘍細胞に発現させて、抗腫瘍効果が惹起されるかどうかを検討した。そこで、肺高転移株であるマウス・ルイス肺がん細胞にFasリガンドあるいはTNF-α遺伝子を導入し、フローサイトメトリーを用いて、それぞれFasリガンドあるいはTNF-α分子発現細胞を作成した。次ぎにこれらの遺伝子導入細胞を同系マウスの皮下に接種し、腫瘍の増殖を検討した。その結果、(1)Fasリガンド遺伝子導入細胞は、腫瘍を形成せず、完全に拒絶された。また、自然肺転移も著しく減少していた。(2)Fasリガンド遺伝子導入細胞を拒絶したマウスには腫瘍特異的な獲得免疫が生じていた。(3)TNF-α遺伝子導入細胞の腫瘍増殖能は親株のそれと変わらなかったが、肺転移巣数は激減していた。(4)TNF-α遺伝子導入細胞を接種したマウスの脾細胞数が、親株接種マウスの脾細胞数と比較して著明に増加していた。このとき、マクロファージが他の細胞集団と比較して相対的に増加していた。実際に、樹状細胞の活性化が見られるかどうかを、マウス骨髄細胞をIL-4とGM-CSFで培養後して得られた樹状細胞と、Fasリガンド遺伝子導入細胞を共培養して検討した。その結果、(1)遺伝子導入細胞と共培養した樹状細胞はクラスターを形成した。(2)主要組織適合抗原クラスIIとCD86の発現上昇は見られなかった。したがって、Fasリガンドは樹状細胞の抗原獲得のプロセスに作用したと考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Kawamura K, Koshikawa N, et al.: "The error-prone DNA polymerase ζ catalytic subunit(Rev3)gene is ubiquitously expressed in normal and malignant human tissues"Int. J. Oncol.. 18. 97-103 (2001)
• [文献書誌] Narita M, Tagawa M, et al.: "Tissite-specific expression of a suicide gene for selective killing of rieuroblastoma cells using a promoter region of the NCX gene"Cancer Gene Ther.. 8. 997-1002 (2001)
• [文献書誌] Iwadate Y, Tagawa M, et al.: "Induction of immunity in peripheral tissues combined with intracerebral transplantation of interleukin-2-producing cells eliminates established brain tumors"Cancer Res.. 61. 8769-8774 (2001)
• [文献書誌] Tada Y, Tagawa M, et al.: "Antitumor effects are produced by forced expression of membrane-bound but not soluble Fas ligand in murine lung carcinoma cells"Anticancer Res.. (in press).
• [文献書誌] Tada Y, Tagawa M, et al.: "Expression of the TNF-α gene on mouse lung carcinoma cells suppresses spontaneous lung metastasis without affecting tumorigencity"Oncol. Rep.. (in press).
• [文献書誌] Tada Y, Tagawa M, et al.: "T cell dependent and independent antitumor immunity generated by the expression of Fas ligand on mouse lung carcinoma cells"Int. J. Mol. Med.. (in press).