| 研究課題/領域番号 |
12671785
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| 研究機関 | 日本大学 |
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研究代表者 |
磯川 桂太郎 日本大学, 歯学部, 講師 (50168283)
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| 研究分担者 |
瀬島 仁美 日本大学, 歯学部, 助手 (50287661)
清水 治 日本大学, 歯学部, 助手 (40260971)
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| キーワード | extracellular matrix / fibrillin / morphogenesis / limb bud / chick embryo / development / immunohistochemistry / immunoprecipitation |
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| 研究概要 |
Hurleら(1989)によって報告された鶏胚肢芽遠位部の好銀性細胞外線維(DV fibril)は、免疫組織化学的には、本研究者らによるFB1抗体およびヒトfibrillin遺伝子の第36-44exonでコードされるタンパク部分に対応するモノクローナル抗体で可染であり、FB1抗体の抗原分子がchicken fibrillinである可能性が強く示唆された。また、FB1抗体はGuanidine HCl未処理の切片においても、DV fibrilを検出できることも明らかになった。一方、radiolabellingした培養肢芽間葉細胞の細胞層およびその上清からFB1抗体によって免疫沈降される分子は、200-kDa以上の移動度を示す分子であり、chicken fibrillin-2を認識するとみられるJB3抗体による沈降物とco-migrateすることが示された。蛍光色素によるdirect labellingを行ったFB1およびJB3抗体で実施した二重免疫染色では、両抗体による陽性反応部がco-localizeしていることが確認された。また、肢芽遠位部の扁平化が形態的に認められるようになる以前の幾つかの発生ステージのin ovo鶏胚後肢芽に対して行った外胚葉上皮のabrationあるいはアルミ薄挿入等の結果、DV fibrilからなるFB1陽性線維系の走行が著しく乱れることが判明し、DV fibrilのin vivoでの分布パターンの決定において、外胚葉上皮が重要な役割を果たしている可能性が示唆された。
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